猪鼻支原体表面可变脂蛋白vlpA黏附宿主细胞功能研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张必雄

作者： 张必雄;熊祺琰;王佳;纪燕;倪博;韦艳娜;冯志新;刘茂军;邵国青

作者机构：

关键词： 猪鼻支原体;可变脂蛋白vlpA;细胞黏附;重复次数

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2016 年 47 卷 09 期

页码： 1897-1904

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)可引起猪的多发性浆膜炎、关节炎、肺炎及中耳炎等多种慢性炎症,感染率极高,且与人类肿瘤的发生有关,对人类健康构成威胁。已有研究表明猪鼻支原体表面可变脂蛋白(vlp)家族参与支原体黏附宿主细胞的过程,本试验主要详细研究vlp家族成员之一vlpA的黏附细胞功能,特别是其Ⅲ区重复片段重复次数变化对其黏附能力的影响。根据GenBank中已公布的vlpA的基因序列,设计引物,从菌体DNA中扩增获得vlpA基因,或者人工合成Ⅲ区重复片段重复次数不等的一系列vlpA基因,均克隆至pET-32a(+)质粒中进行表达,获得目的蛋白质。同时利用固相合成法制备含两段Ⅲ区重复片段的多肽。利用间接免疫荧光试验和微孔板黏附试验检测所制备的各种重组vlpA蛋白和多肽的黏附功能。通过诱导表达和镍柱亲和层析纯化,成功获得纯度较高的各个目的蛋白质。利用间接免疫荧光试验证实vlpA可以黏附宿主细胞;利用微孔板黏附试验定量检测不含Ⅲ区的重组vlpA0蛋白及Ⅲ区重复片段多肽的黏附能力,结果发现vlpA0可黏附细胞,而Ⅲ区重复片段多肽无明显黏附能力;进一步利用微孔板黏附试验检测含Ⅲ区重复片段次数分别为3、6、9、12次的重组蛋白vlpA3、vlpA6、vlpA9、vlpA12的黏附能力,结果显示四种重组蛋白质均可黏附细胞,但黏附水平均低于不含Ⅲ区的重组vlpA0蛋白,且随着Ⅲ区重复片段重复次数的增加黏附能力下降。本研究结果提示vlpA为猪鼻支原体黏附因子之一,其Ⅱ区含有黏附位点,而整体分子的黏附能力随着Ⅲ区重复片段重复次数的增加明显减弱。本研究结果有助于进一步研究猪鼻支原体的黏附及致病机制。

分类号： S852.62

  • 相关文献

[1]猪鼻支原体表面可变脂蛋白VlpB黏附宿主细胞功能研究. 胡永婷,张必雄,王佳,冯志新,邵国青,熊祺琰. 2018

[2]猪鼻支原体可变脂蛋白家族重组蛋白的构建表达及黏附细胞功能检测. 纪燕,熊祺琰,王佳,张必雄,倪博,马庆红,冯志新,刘茂军,邵国青. 2016

[3]数理统计在植保试验研究中的应用第二讲如何进行试验设计. 唐启义. 2001

[4]flaA基因的缺失对绵羊脑炎单核细胞增生李斯特菌的细胞黏附、侵袭能力及生物被膜形成能力影响的研究. 柴迎锦,孔静雅,邬琴,李劼,周霞,马勋,韩猛立. 2020

[5]地衣芽孢杆菌A1在斑点叉尾鮰肠道的定植. 张洪玉,王海波,赵明军,焦丽亭,胡鲲,杨先乐,夏磊. 2019

[6]我国北部冬麦区小麦区域试验重复次数和试点数量的优化设计. 张毅,许乃银,郭利磊,杨子光,张笑晴,杨晓妮. 2020

[7]我国棉花品种区域试验重复次数和试点数量的设计. 许乃银,金石桥,李健. 2016

[8]OCT蛋白对猪链球菌生物被膜形成和细胞黏附的影响. 梅京京,汪洋,易力,张建康,程相朝. 2016

[9]结核分枝杆菌黏附蛋白Rv0394c的结晶及其对分枝杆菌致病性的影响. 唐阳阳,李华芳,邵明珠,藏鑫鑫,崔子寅,陈利苹,党光辉,刘思国. 2022

[10]滑液支原体烯醇化酶在感染宿主中的反应原性和细胞黏附性. 徐彬,孙玉,王树,于岩飞,王晓丽,马孙婷,孙华伟,张敬峰,刘传敏,吕立新,冯志新,熊祺琰,邵国青,张小飞,欧阳伟. 2024

[11]小麦白粉菌SSR标记的开发及其在群体遗传多样性中的初步应用. 张国珍,沈崇尧,段霞瑜,周益林. 2010

[12]我国■麻品种资源的利用研究. 凃敦鑫,段醒男. 1963

[13]巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用. 白方方,武昱孜,靳蒙蒙,刘茂军,冯志新,熊祺琰,邵国青. 2013

[14]猪鼻支原体血清抗体间接ELISA检测方法的建立. 王佳,熊祺琰,华利忠,刘蓓蓓,甘源,冯志新,刘茂军,武昱孜,邵国青. 2017

[15]1株猪鼻支原体的分离鉴定及致病性. 王佳,华利忠,刘蓓蓓,张磊,袁厅,甘源,韦艳娜,邵国青,冯志新,熊祺琰. 2021

[16]1株猪鼻支原体特异性单克隆抗体的制备及鉴定. 田瑞雨,熊祺琰,倪博,王佳,韦艳娜,冯志新,邵国青. 2017

[17]2014—2018年浙江省3种猪支原体流行病学调查. 徐丽华,兰胜芝,李军星,余斌,张鹏超,李宝臣,袁秀芳. 2019

[18]检测猪鼻支原体抗原的ELISA方法的建立及其应用. 朱红振,危艳武,黄立平,刘丹,夏德利,吴洪丽,边海桥,冯力,刘长明. 2019

[19]猪鼻支原体攻毒模型研究进展. 纪燕,熊祺琰,韦艳娜,马庆红,刘占军,邵国青. 2013

[20]猪鼻支原体黏附宿主细胞间接免疫荧光检测方法的建立. 纪燕,熊祺琰,韦艳娜,马庆红,白方方,冯志新,刘茂军,邵国青. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序