稳定表达猪Viperin的PK-15细胞系的构建与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李文良

作者： 李文良;毛立;杨蕾蕾;郝飞;张纹纹;江杰元

作者机构：

关键词： 猪;Viperin;PK-15细胞系;表达

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2016 年 32 卷 01 期

页码： 128-132

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了探讨先天免疫效应因子Viperin的抗病毒作用,从猪外周血单核细胞中成功扩增了猪Viperin基因完整阅读框,克隆到真核表达载体p EGFP-C1中构建重组表达质粒p EGFP-Vi。阳性质粒经PCR、酶切和测序鉴定后通过脂质体Lipofectamine 2000介导转染PK-15细胞,荧光显微镜观察发现融合蛋白质EGFP-Viperin定位于细胞质中,不同于对照质粒EGFP在细胞中的均匀分布。共聚焦检测结果表明,重组蛋白质主要定位于细胞的内质网上。Western blot检测结果表明,猪Viperin蛋白质在PK-15细胞中以融合蛋白质的形式稳定表达,分子量约为7.0×104。

分类号： S852.2

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