柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建及其基因的克隆与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 林青

作者： 林青;才学鹏;窦永喜;翟军军;闫鸿斌;张彦明;田广孚;景志忠

作者机构：

关键词： 柔嫩艾美耳球虫;孢子化卵囊;子孢子;cDNA表达文库;构建

期刊名称： 中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集

ISSN：

年卷期： 2006 年

页码： 1

收录情况： CSCD

摘要： 在无Rnase污染的环境下,提取柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)子孢子RNA,进而纯化mRNA,采用oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和第二链,并在其两端加EcoRI／HindIII定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRI／HindIII粘性末端的ZSCREEN载体的两臂之间。用PhageMakerextract对以上连接产物进行体外包装,形成完整的噬菌体,并用该噬菌体转染大肠杆菌ER1647,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆E．tenella3-1E基因,并进行测序。结果表明,成功构建了E．tenel...

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