胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建及其分子分析
文献类型: 中文期刊
第一作者: 黄贵修
作者: 黄贵修;薛迎春;卢昕
作者机构:
关键词: 胶孢炭疽菌;T-;DNA;插入突变;PCR;Southern杂交
期刊名称: 热带作物学报
ISSN: 1000-2561
年卷期: 2008 年 29 卷 01 期
页码: 31-36
收录情况: CSCD
摘要: 利用根癌农杆菌介导的T-DNA插入遗传转化体系转化杧果炭疽菌SC2菌株,共获得抗潮霉素B突变体4680个,平均每转化1.0×106个炭疽菌分生孢子可得到300~980个突变体,且潮霉素抗性在多次传代实验中得到稳定遗传。随机挑取38个突变体进行PCR检测,均可扩增出1条约1.2kb的目标谱带,说明突变体为T-DNA插入引起;进一步的Southern blot杂交分析结果表明,在随机挑选的20个突变体中,有1个(5%)为三拷贝T-DNA插入,4个(20%)为双拷贝插入,剩余的15个(75%)为单拷贝插入。
分类号: S432.4
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