猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在转基因玉米中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曾作财

作者： 曾作财;许承扬;张晓东;王金洛;杨兵;李国平

作者机构：

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;纤突糖蛋白;转基因玉米;表达

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2012 年 10 卷 05 期

页码： 43-48

收录情况： CSCD

摘要： 本研究拟构建携带猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白基因(TGEV-S)的转基因玉米植株并检测其表达情况。首先利用PCR方法自携带TGEV-S基因的重组质粒中扩增2.2kb的S基因片段,然后插入植物表达载体pBAC176中,该表达载体以编码除草剂草甘膦抗性的EPSP基因作为选择标记,目的基因以双增强子的CaMV35S(E35S)及其玉米Hsp70第一内含子为驱动。以授粉后10～12d约0.5～1mm大小的玉米幼胚为受体,用基因枪进行转化,经过愈伤组织诱导、草甘膦抗性筛选和分化再生培养,先后获得74株转化再生植株。利用PCR和Southern blot检测表明,T0代转基因苗有9株检测结果为阳性。T1代转基因玉米株系经PCR检测有14个转基因株系为阳性,初步确定了目的基因在这些转基因玉米中的稳定整合。进而通过间接ELISA分析初步确定目的基因在7个T1代转基因玉米株系获得了表达。研究结果为进一步研究表达TGEV-S转基因玉米的生物学活性奠定了基础。

分类号： S513

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