传染性支气管炎病毒N蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘清艳

作者： 刘清艳;王欢;丁铲;钱琨;廖瑛;方守国

作者机构：

关键词： 传染性支气管炎病毒;N蛋白;多克隆抗体

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2024 年 004 期

页码： 179-187

摘要： 本研究以IBV Beaudette株基因组为模板获得N基因片段，构建重组原核表达质粒pET-32a-His-IBV-N，在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达，纯化后获得带有His标签的N重组蛋白。将其与等体积的弗氏完全佐剂混匀乳化后免疫BALB/c小鼠3次，收集血清，得到鼠源抗N蛋白多克隆抗体。利用间接免疫荧光试验和Western blot鉴定多克隆抗体的特异性。结果显示，N蛋白多克隆抗体能特异性识别转染表达的Flag-N蛋白和IBV感染表达的N蛋白，说明此抗体能识别N蛋白的线性表位和空间表位，可应用于Western blot和间接免疫荧光实验。本研究为进一步研究N蛋白的功能和IB的诊断提供了技术支撑。

分类号： S852.65

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