柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 麦博

作者： 麦博;覃宗华;于三科;余劲术;吕敏娜;吴彩艳;林青;蔡建平

作者机构：

关键词： 柔嫩艾美球虫;表面抗原10;基因克隆;表达;免疫

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2007 年 37 卷 09 期

页码： 751-755

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增EtSAG10基因,与pGEM-T Easy载体连接后转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,扩增不含N端信号肽的编码序列,分别插入表达载体pET-32a(+)和pMAL-c2X,转化至E.coliRosetta,以IPTG诱导表达。结果表明,pET-32a(+)-EtSAG10在E.coliRosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43%,融合蛋白分子质量约为47 ku,以包涵体形式存在;而pMAL-c2X-EtSAG10在E.coliRosetta中表达的重组蛋白为可溶性,表达产物约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白分子质量约为69 ku。以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg/只肌肉注射免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数(OPG)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)评价,免疫组相对盲肠卵囊产量为47.7%,抗球虫指数由86.79提高至152.13。提示,重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护。

分类号： S852.7

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