果胶裂解酶基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋立立

作者： 宋立立;顿宝庆;奚亚军;彭源德;白娜

作者机构：

关键词： 果胶裂解酶;基因克隆;原核表达;酶学特性

期刊名称： 食品科技

ISSN： 1005-9989

年卷期： 2010 年 09 期

页码： 2-7

收录情况： 北大核心

摘要： 利用PCR技术从枯草芽孢杆菌T66(Bacillus subtilis)基因组DNA中扩增得到果胶裂解酶编码基因pl(GU644446),并构建基因表达载体pPAL7-pl重组质粒,转化受体菌E.coli BL21进行原核表达分析。诱导表达条件为温度37℃、时间4 h、IPTG浓度0.8 mol/L,经SDS-PAGE分析表明果胶裂解酶编码基因pl表达的重组酶蛋白相对分子质量为45 ku。对该基因重组酶粗酶液的酶学性质进行了初步分析,表明该酶最适反应温度为50℃、最适反应pH8,添加5.5 mmol/L的Ca2+的条件下,测得果胶裂解酶的最高比酶活为30 U/mL。含有果胶裂解酶编码基因pl的重组质粒遗传稳定。

分类号： Q78

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