人FcγRⅡ真核表达质粒的构建及稳定转染细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 席俊

作者： 席俊;张改平;张利娜;张红;乔松林;苗现伟;何礼洋;张乃生

作者机构：

关键词： huFcγRⅡ受体;COS7细胞;免疫荧光检测;玫瑰花环试验

期刊名称： 第二军医大学学报

ISSN： 0258-879X

年卷期： 2008 年 09 期

页码： 1110-1113

收录情况： 北大核心

摘要： 目的:建立稳定表达人FcγRⅡ(human Fc gamma receptor Ⅱ,huFcγRⅡ)的真核细胞系,为后续研究奠定基础。方法:采用RT-PCR方法从人外周血白细胞合成FcγRⅡcDNA,构建huFcγRⅡ表达质粒pcDNA3-huFcγRⅡ,经酶切和PCR鉴定后,将pcDNA3-huFcγRⅡ质粒通过脂质体转染法转染COS7细胞,并经G418筛选获得稳定表达huFcγRⅡ的细胞克隆。采用免疫荧光法和玫瑰花环试验检测huFcγRⅡ的表达。结果:构建的pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒经酶切鉴定与预期一致,稳定转入COS7细胞后,经免疫荧光染色,约90%的转染细胞可见荧光,而未转染的COS7对照细胞未见荧光。结论:成功构建pcDNA3-huFcγRⅡ真核表达质粒,建立了稳定表达huFcγRⅡ的细胞系,为进一步研究奠定了基础。

分类号： Q785

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