与吕氏泰勒虫TlSP蛋白互作的绵羊淋巴细胞蛋白酵母双杂交系统的筛选

文献类型: 中文期刊

第一作者: 秦鸽鸽

作者: 秦鸽鸽;韩元;李有全;殷宏;罗建勋;蔡葵蒸

作者机构:

关键词: 吕氏泰勒虫;绵羊淋巴细胞;酵母双杂交;cDNA文库

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2016 年 01 期

页码: 31-37

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为研究吕氏泰勒虫入侵绵羊淋巴细胞的机理,用绵羊外周血淋巴细胞构建酵母双杂交文库,筛选与TlSP蛋白互作的蛋白。以密度梯度离心法分离出未感染泰勒虫的绵羊淋巴细胞,TRIzol法提取总RNA,建立酵母双杂交cDNA文库。结果显示,对文库进行评定,细胞密度为1.075×109/mL,插入片段长度在250~3 000bp之间,文库滴度为1.088×108 CFU,重组率为92%。利用诱饵质粒pGBKT7-TlSP对文库进行筛选,结果筛选到9种蛋白。生物信息学分析结果显示,这些蛋白主要参与调控基因转录、mRNA翻译、细胞的增殖、分化和凋亡等过程。上述结果表明,通过酵母双杂交技术筛选出与TlSP互作的蛋白,据此推测TlSP蛋白可能与吕氏泰勒虫在绵羊淋巴细胞内的增殖相关。

分类号: S858.26

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