小鼠胚胎Sry基因的RNA干涉研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵金红

作者： 赵金红;杜卫华;道尔吉;裴杰;张丽;林秀坤

作者机构：

关键词： siRNA;Sry;小鼠胚胎;基因沉默

期刊名称： 生物化学与生物物理进展

ISSN： 1000-3282

年卷期： 2006 年 33 卷 09 期

页码： 85-89

收录情况： SCI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究Sry基因的调控网络,采用siRNA技术使Sry基因沉默,探讨了有效沉默Sry基因的途径和最佳条件.设计、合成针对小鼠Sry基因的发夹状寡核苷酸链,退火后连入真核表达载体pSilencer4.1-CMVneovector,构建以小鼠Sry基因为靶点的siRNA干涉载体pSilencer4.1/Sry217及pSilencer4.1/Sry565,通过尾静脉注射法将载体质粒导入妊娠小鼠体内,于小鼠妊娠第11.5天,即11.5dpc(dayspostcoitum,性交后天数)取出胚胎,采用双重PCR法对胚胎进行性别鉴定,鉴定为雄性的胚胎采用半定量RT-PCR法检测Sry基因的表达量,研究不同干扰序列、不同注射时间及注射剂量对Sry基因表达量的影响.研究结果,确定了质粒的最佳注射时间为9.5dpc,注射剂量为20μg,注射干扰质粒pSilencer4.1/Sry565对Sry基因的抑制效率达85%左右.结果表明,siRNA可以显著抑制雄性胚胎Sry基因的表达.

分类号： Q344

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