猪γ-干扰素在重组杆状病毒中的表达及其抗病毒活性的测定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 秦立廷

作者： 秦立廷;王喜军;胡森;李志中;陈伟业;葛金英;刘思当;步志高

作者机构：

关键词： γ-干扰素;猪;重组杆状病毒;抗病毒活性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2007 年 23 卷 03 期

页码： 386-391

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有猪γ-干扰素(porcine interferon-γ,PoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-PoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-PoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达PoIFN-γ的重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ。以抗PoIFN-γ单克隆抗体为一抗进行Western blot、间接免疫荧光(IFA)及间接ELISA检测,结果表明PoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ感染的昆虫细胞中获得正确表达。抗病毒活性试验显示,重组杆状病毒表达rPoIFN-γ能有效抑制水疱性口炎病毒(VSV)在猪肾细胞系(PK-15)的复制,rBac-PoIFN-γ感染昆虫细胞培养上清抗病毒活性为2×104抑制单位(IU)/mL,其抗病毒活性可以被鼠抗原核表达重组PoIFN-γ免疫血清有效阻断。结果表明rPoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ在感染昆虫细胞获得有效表达,并具有高效抗病毒活性。

分类号： Q789`S852.5

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