禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贠炳岭

作者： 贠炳岭;李德龙;胡晓亮;刘在斯;秦立廷;吴关;刘文;祁小乐;王永强;高宏雷;高玉龙;王笑梅

作者机构：

关键词： 禽白血病病毒;p27蛋白;原核表达;单克隆抗体

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2012 年 34 卷 10 期

页码： 782-785

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原的单克隆抗体(MAb),本研究从ALV-J病毒株感染DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出ALV群特异性抗原p27基因,并将其克隆至pMD18-T载体中,酶切鉴定后进行序列测定和分析。最后将p27基因亚克隆至载体pET-30a(+)中,转化受体菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测获得融合蛋白。经过western blot检测,表达的蛋白具有良好的反应原性。将纯化的p27蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得5株能稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株。5株MAb与纯化的p27蛋白以及不同亚群ALV可以发生特异性反应。所制备的MAb为禽白血病的诊断方法研究奠定了基础。

分类号： S852.65

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