猪背最长肌PFK-2/FBPase-2荧光定量RT-PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李朋颖

作者： 李朋颖;汤晓艳;王敏;康大成;颜成英

作者机构：

关键词： 猪;PFK-2/FBPase-2 mRNA;SYBR Green I;荧光定量实时-聚合酶链式反应

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2014 年 35 卷 14 期

页码： 113-117

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究糖酵解关键酶果糖-6-磷酸-2激酶/果糖-2,6-二磷酸酯酶(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase,PFK-2/FBPase-2)基因转录水平与宰后肉品质间的关系,根据猪PFK-2/FBPase-2 mRNA序列(GenBank登录号:NM_001143721.1)设计一对特异性引物并选择β-actin作为内参基因,构建含有各自序列的重组质粒标准品,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量实时-聚合酶链式反应技术检测猪PFK-2/FBPase-2基因转录水平的方法。结果表明,所建立的方法线性关系好,目的基因与内参基因R2均大于0.999;灵敏度高,两基因检出下限均为10拷贝/μL;特异性好,扩增产物均有特异性单一峰。同时根据标准曲线计算可知目的基因与内参基因的扩增效率分别为104.5%和104.0%,扩增效率接近一致,可对PFK-2/FBPase-2转录水平进行相对定量。本研究选取PSE肉产生程度不同的三元杂交猪、杜洛克猪和太湖猪,利用建立的方法对不同品种猪宰后45 min背最长肌中PFK-2/FBPase-2 mRNA转录水平进行测定,结果表明,太湖猪转录水平最高、杜洛克次之、三元杂交猪最低,且3个品种间有显著性差异(P<0.05)。

分类号： O657.3`TS251.51

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