基于CD10+干细胞的诱导分化及人源抗体基因制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙赫

作者： 孙赫;王瑜;蔄弘扬;邱玥;田园;李泽鸿;岳玉环

作者机构：

关键词： CD10+干细胞;间接免疫荧光;ELISA;RT-PCR

期刊名称： 中国免疫学杂志

ISSN： 1000-484X

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 590-594

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的：探讨体外CD10+干细胞与VSV病毒共培养分化后，能否从分化后细胞的基因组中扩增出成熟抗体IgG重链（VH）、轻链（VL）可变区基因片段。方法：37℃培养CD10+干细胞至单层细胞，B细胞扩增培养基及添加的白介素因子、VSV病毒与CD10+干细胞共培养15 d，留存每天细胞上清测定IgM含量，以15 d细胞为样本抽提总RNA，反转录为cDNA，以其为模板，用单链抗体（ScFv）噬菌体抗体库构建引物扩增VH、VL。结果：利用含VSV病毒、IL-2、IL-4、IL-7、IL-10、IL-21、CD40L的B细胞扩增培养基成功将CD10+干细胞分化为CD38、CD138阳性浆细胞，IgM含量随时间递减，诱导15 d后成功扩增出成熟抗体IgG的370 bp VH、320 bp VL可变区基因片段。结论：成功完成了基于CD10+干细胞的人源抗体基因获取，可用于各类人畜共患病病毒噬菌体抗体库构建。

分类号： R392

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