犬细小病毒NY株VP2蛋白多克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 毛倩倩

作者： 毛倩倩;周灵;唐青海;卜宾;唐存多;焦铸锦;姚伦广;阚云超;杨建伟;崔尚金

作者机构：

关键词： 犬细小病毒;VP2基因;多克隆抗体;免疫活性

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2016 年 43 卷 07 期

页码： 1659-1666

收录情况： 北大核心

摘要： 试验旨在制备犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)VP2蛋白多克隆抗体。构建pET28a-CPV-VP2重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达,纯化目的蛋白与佐剂混合、乳化制备后作为免疫原,免疫家兔制备VP2蛋白多克隆抗体;采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(immunoperoxidase monolayer assay,IPMA)检测抗体的免疫活性、抗体滴度、病毒滴度及中和活性。结果表明,重组VP2蛋白(rVP2)以包涵体形式存在,分子质量约为72ku;所制备的多克隆抗体滴度为1 600倍,病毒滴度为107 TCID50/mL,中和效价为1∶2 884,该抗体与体外培养的CPV呈特异性反应,CPV VP2蛋白的多克隆抗体免疫活性和特异性良好,且中和活性高,为CPV基因工程疫苗的研究和临床治疗奠定了基础。

分类号： S852.655

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