miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响

文献类型: 中文期刊

第一作者: 任秀美奥

作者: 任秀美奥;姚旭东;蒙亚琦;郭延华;唐红;张译元;赵兴旺;王立民;周平

作者机构:

关键词: miR-449b;早期胚胎;H3K9me3;精子

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2022 年 007 期

页码: 2661-2668

收录情况: 北大核心

摘要: 【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在培养箱中培养16~18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,通过实时荧光定量PCR比较绵羊精子、成熟卵母细胞与成纤维细胞中miR-449b的相对表达量;给成熟卵母细胞分别显微注射0.9%生理盐水(Con组)、miR-449b模拟物对照(NC mimic)与miR-449b模拟物(miR-449b mimic),注射后进行孤雌激活,分别于激活的第2、7天统计胚胎卵裂率与囊胚率;将成熟卵母细胞进行体外受精(IVF),收集IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎,采用免疫荧光法比较组蛋白H3K9me3的变化。【结果】miR-449b在精子中的表达显著高于成熟卵母细胞和成纤维细胞(P<0.05);与Con组相比,miR-449b mimic和NC mimic组胚胎的卵裂率均显著降低(P<0.05),NC mimic组胚胎卵裂率显著低于miR-449b mimic组(P<0,05);miR-449b mimic组胚胎囊胚率提高,但差异不显著(P>0.05);IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎均表达组蛋白H3K9me3,且都在细胞核表达。与Con组相比,NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著增加(P<0.05),miR-449b mimic组显著降低(P<0.05);NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著高于miR-449b mimic组(P<0.05),miR-449b mimic与IVF组无显著差异(P>0.05)。【结论】miR-449b能显著提高绵羊早期胚胎的发育率,且降低早期胚胎中H3K9me3的表达水平。

分类号: S826

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