对虾白斑综合征病毒LAMP检测方法的建立
文献类型: 中文期刊
第一作者: 冯华
作者: 冯华;张改平;郭军庆;王爱萍;赵丽娜;杜晓明;王林林
作者机构:
关键词: 对虾白斑综合征病毒;环介导等温扩增;巢式聚合酶链反应;VP28基因
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2011 年 07 期
页码: 707-711
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28的基因序列设计合成4条特异性引物,以pMDT-VP28重组质粒为标准模板,通过优化反应体系和反应条件,建立了WSSV的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,测定LAMP对WSSV-DNA的最低检测限,并与巢式PCR进行了比较。结果显示,该LAMP方法的最佳反应温度为65℃,反应时间为60min;LAMP对WSSV的最低检测限为10copies/μL,而巢式PCR为100copies/μL,表明该LAMP方法的敏感性显著高于巢式PCR检测方法。因此,WSSV的LAMP检测方法比PCR更为简便、快速、灵敏,且无需昂贵的变温仪器,更适应水产养殖的现地检测,本研究为WSSV早期感染的快速检测提供了新方法。
分类号: S945
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