山羊副流感病毒3型HN蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周天赐

作者： 周天赐;毛立;李文良;郝飞;魏建忠;江杰元

作者机构：

关键词： 山羊副流感病毒3型;HN蛋白;单克隆抗体;鉴定;IFA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2016 年 04 期

页码： 436-441

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备山羊副流感病毒3型(caprine parainfluenza virus type 3,CPIV3)HN蛋白单克隆抗体,将CPIV3 HN基因1081~1725 bp片段(编码361~574 aa)克隆入原核表达载体p ET-32a(+),构建重组表达质粒p ET-32a(+)-HN361-574 aa,转化至大肠杆菌Rosetta(BL21)感受态细胞并进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组表达蛋白。结果表明,CPIV3 HN蛋白361~574 aa片段被正确表达。用两段截短的HN蛋白混合免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾与骨髓瘤细胞SP2/0融合制备单克隆抗体,分别用间接ELISA、Western-blot和IFA筛选和鉴定融合细胞上清。通过筛选获得3株杂交瘤细胞,分别命名为3F1、4A7、4H4,进一步研究表明,这3种单克隆抗体至少识别2个不同的抗原表位。本研究为CPIV3病原学检测方法的建立以及病理学诊断奠定了重要的基础。

分类号： S852.654

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