三种无花果病毒的多重RT-PCR检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吐逊艾力·艾孜提力

作者： 吐逊艾力·艾孜提力;侯婉莹;郭庆元;古丽尼沙·卡斯木;代毅;李世访;麦合木提江·米吉提

作者机构：

关键词： 无花果;病毒;多重RT-PCR

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2021 年 016 期

页码： 5414-5420

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了快速检测危害无花果的病毒种类,本研究建立了一种同时检测3种无花果病毒的多重RT-PCR检测体系,包括无花果斑点相关病毒（fig fleck-associated virus, FFkaV）、无花果叶斑相关病毒（fig leaf mottleassociated virus, FLMaV）和无花果花叶病毒（fig mosaic virus, FMV）。根据三种病毒基因保守区域设计特异性引物,分别对cDNA用量、dNTPs用量、EasyPfu DNA聚合酶用量、Mg SO4用量、退火温度和引物组合进行优化,并利用RT-PCR进行验证。结果显示,总体积为25μL的反应体系中EasyPfu DNA聚合酶（2.5 U/μL）用量0.7μL、cDNA用量1.0μL、dNTPs （2.5 mmol/L）用量2.5μL、Mg SO4（50 mmol/L）用量1.2μL、引物组合为1.5μL,1.0μL,0.3μL、ddH2O为14μL、退火温度56℃时能够扩增出清晰的目的条带,该检测体系的检测极限为6.8 ng/μL的cDNA。田间样品的检测结果表明,该方法能够快速、准确地检测这3种无花果病毒,可用于田间无花果样品的检测。本研究建立的多重RT-PCR检测体系为无花果病毒的检测与防控提供技术支持。

分类号： S436.639

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