番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因原核表达蛋白的抗血清制备及其检测应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 赵芹

作者： 赵芹;李华平;谢大森;何晓明;张曙光;罗少波

作者机构：

关键词： 番木瓜;番木瓜环斑病毒;外壳蛋白基因(cp);原核表达;抗血清制备

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2012 年 39 卷 08 期

页码： 1457-1464

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以受番木瓜环斑病毒(Papaya ring spot virus,PRSV)侵染的番木瓜(Carica papaya)叶片为供试材料,采用RT-PCR方法克隆其外壳蛋白基因cp,并将其连接到原核表达载体pET-28b(+)上,酶切鉴定及克隆测序确定开放阅读框的正确性,将获得的重组质粒转化大肠杆菌表达宿主菌。通过摸索转化的表达宿主菌种类、IPTG浓度及诱导时间,获得高效表达PRSVcp的条件。SDS-PAGE分析结果表明,CP融合蛋白分子量为36.8kD。以Ni2+-NTA亲和层析柱纯化的融合蛋白为抗原,免疫注射新西兰大白兔制备得到高效价抗体,间接ELISA测定效价为1︰16384。Western blot检测结果表明,制备的抗血清可与诱导表达的融合蛋白发生特异性反应。通过ID-ELISA检测田间样品证实了制备的抗血清与PRSV侵染病叶发生了良好的特异性反应。本试验为PRSV的快速检测以及PRSV编码蛋白的功能研究奠定了基础。

分类号： S436.67

  • 相关文献

[1]基于RNAi抗PRSV番木瓜株系的培育及其分子特征验证. 黄静,贾瑞宗,孔华,郭静远,王绪朋,郭安平. 2017

[2]用Golden Gate法构建广谱抗番木瓜环斑病毒海南株系的CRISPR/FnCas9植物表达载体. 王绪朋,赵辉,贾瑞宗,孔华,郭运玲,郭安平. 2018

[3]番木瓜环斑病毒海南株系植物RNAi表达载体的构建. 赵辉,张雨良,孔华,贾瑞宗,朱芸,郭安平,曾会才,彭明. 2015

[4]基因沉默番木瓜环斑病毒复制酶基因(PRSV-Nib)获得抗病毒病番木瓜的研究. 吴清铧,贾瑞宗,郭静远,杨牧之,胡玉娟,郝志刚,赵辉,郭安平. 2024

[5]应用现代生物技术防治番木瓜RNA病毒研究进展. 赵辉,贺萍萍,郭静远,孔华,郭安平. 2017

[6]水稻瘤矮病毒S9基因的生物信息学分析及原核表达蛋白的抗血清制备. 赵芹,邓永枢,阮小蕾,李华平. 2010

[7]水稻瘤矮病毒S11基因沉默抑制子的原核表达及抗血清制备. 赵芹,沈文锦,张翼翔,刘福秀,李华平. 2010

[8]小麦黄花叶病毒P2蛋白原核表达、抗血清制备及其在感病小麦细胞中的定位. 杨狄,周燕茹,谢礼,孙丽英,陈剑平. 2014

[9]黄瓜绿斑驳花叶病毒基因组全序列分析及病害的田间调查. 肖彩利,郑红英,吴晓花,李国景,燕飞,陈剑平. 2016

[10]烟草丛顶病毒(TBTV)ORF3和ORF4的原核表达、抗血清制备及应用. 龙亚芹,王万东,左瑞娟,李凡,尹朝先,陈海如. 2011

[11]薤花叶病毒外壳蛋白抗血清制备及其与相关病毒血清学关系. 史雨红,陈炯,陈剑平. 2006

[12]广东番茄黄化曲叶病毒AC2基因的原核表达及抗血清制备. 赵芹,李华平,何自福,佘小曼,谢大森,何晓明,彭庆务. 2011

[13]香蕉束顶病毒Haikou 2分离物DNA2编码框原核表达及抗血清制备. 谭老喜,王洪星,张雨良,王健华,章绍延,周朋,余乃通,刘志昕. 2012

[14]槟榔植原体膜蛋白基因的克隆及其抗血清制备. 杨文君,余乃通,张雨良,王健华,刘志昕. 2014

[15]PRSV-NIb基因同源dsRNA的原核表达及其在番木瓜叶片原生质体瞬时表达体系中诱导RNA沉默的研究. 杨国峰,沈文涛,言普,黎小瑛,周鹏. 2013

[16]大蒜E病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备. 林林,郑红英,陈炯,陈剑平. 2004

[17]原核表达番木瓜环斑病毒NIa-Pro及其双重酶活鉴定. 韩杰,郑继平,言普,庹德财,黎小瑛,沈文涛,周鹏. 2016

[18]香蕉束顶病毒海口分离物Rep基因的克隆、原核表达、抗血清制备及检测. 余乃通,冯团诚,王健华,张雨良,刘志昕. 2011

[19]甘薯褪绿斑病毒外壳蛋白的分子变异及其特异抗血清制备. 乔奇,秦艳红,张德胜,田雨婷,王爽,王永江,张振臣. 2014

[20]水稻CSN5B蛋白抗血清的制备及其应用. 羊健,张松柏,张恒木,刘勇,陈剑平. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序