日本脑炎病毒NS3基因C端的表达与多克隆抗体研制

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邓绪芳

作者： 邓绪芳;史子学;邱亚峰;沈阳;邵东华;马志永

作者机构：

关键词： 日本脑炎病毒;NS3;表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2010 年

页码： 5

收录情况： CSCD

摘要： 获得NS3基因C端重组蛋白、研制抗NS3蛋白的多克隆抗体。根据GenBank发表的SA14-14-2株的序列(AF315119),设计并合成了1对引物扩增NS3基因C端(955～1857bp)。从感染JEV的细胞样品中提取总RNA,RT-PCR扩增出大小约900bp的片段。通过测序验证正确后,将该片段插入到pET-28a(+)载体,命名为pET-28a-NS3C。将该质粒转化BL21(DE3),成功诱导表达出NS3C蛋白。将该蛋白免疫小鼠制备的多抗血清。通过IFA和WB验证,该血清能特异识别JEV感染Vero细胞中的NS3蛋白,大小约72kD,并主要位于感染细胞的胞浆中。

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