乙型脑炎病毒结构蛋白PrM单克隆抗体的制备和分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈梦莉

作者： 陈梦莉;谢丰玉;张彤;郑家杨;魏建超;李宗杰;李蓓蓓;邱亚峰;马志永;邵东华;刘珂;冯秀丽

作者机构： 南京农业大学动物医学院;中国农业科学院上海兽医研究所

关键词： 日本乙型脑炎病毒;PrM/M;单克隆抗体

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN：

年卷期： 2023 年 006 期

页码： 76-81

收录情况： 北大核心

摘要： 为了制备乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）结构蛋白PrM单克隆抗体，首先根据NCBI参考序列（GQ918133.2）设计PrM引物扩增目的基因，将目的基因构建至pColdⅠ原核表达质粒上；然后鉴定阳性克隆质粒并转化至BL21（DE3）感受态细胞，经诱导表达蛋白纯化后。免疫6周龄BALB/c小鼠，进行杂交瘤细胞融合，并对融合细胞进行克隆筛选；最后将筛选阳性的杂交瘤细胞制备腹水获取单克隆抗体，采用间接ELISA检测抗体效价，Western blot和间接免疫荧光检测抗体特异性和病毒感染过程。结果显示：成功构建了pCold I-PrM原核表达载体，PrM蛋白在1 mmol/L IPTG 16℃过夜诱导培养时表达量较高，亚克隆后经腹水制备获得2株针对PrM区域的单克隆抗体，Western blot和间接免疫荧光检测2株单抗能够特异性识别JEV的PrM区蛋白，获得的单抗能够鉴定JEV在细胞内的感染过程。本研究为进一步研究JEV鉴别诊断技术和生物学功能提供基础。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]猪乙脑病毒WHe株的PrM-E、NS1、E-NS2A基因的克隆及序列测定. 乔宪凤,熊东海,郑新民,徐涤平,赵浩斌,魏庆信. 2003

[2]猪乙脑病毒WHe株的PrM―E、NSl、E―NS2A基因的克隆及序列测定. 乔宪凤,熊东海,郑新民,徐涤平,赵浩斌,魏庆信. 2003

[3]日本乙型脑炎病毒NS3蛋白的真核表达及鉴定. 王双双,赵红梅,周丹娜,蔡行,耿超. 2019

[4]日本乙型脑炎病毒NS5rdrp蛋白的真核表达及鉴定. 耿超,赵红梅,周丹娜,蔡行,王双双. 2019

[5]猪乙脑病毒HW株的全基因组克隆及分析. 付文鹏,陈建军,岳桂平,熊东海,徐涤平,杨在清. 2006

[6]猪乙脑病毒CSF.XZ-2D株的分离鉴定及其体外培养特性研究. 滕蔓,罗俊,樊剑鸣,王兴涛,王方雨,柴书军,杨继飞,张改平. 2012

[7]展示日本乙型脑炎病毒B细胞表位和T细胞表位的猪细小病毒病毒样颗粒的制备. 蒋春英,魏建超,史子学,钟登科,邵东华. 2013

[8]日本乙型脑炎病毒对干扰素诱导基因ISG15表达的影响. 杨晶,华涛,唐波,唐应华,侯继波,张道华,黄克和. 2017

[9]莱克多巴胺单克隆抗体的研制及阻断ELISA检测方法的建立. 张海棠,王自良,邓瑞广,钟华,范国英. 2008

[10]贫血患者血清转铁蛋白受体测定的临床意义. 乔宏,吴春梅,管洪在,王文正. 2000

[11]满江红鱼腥藻单克隆抗体的制备和应用研究. 刘中柱,程由铨,唐龙飞,郑琦,宋铁英,陈明昂,李怡英,林天龙. 1989

[12]大豆花叶病毒东北3号株系NIb蛋白表达、纯化及单克隆抗体制备. 张淋淋,李小宇,张春雨,尤晴,张正坤. 2016

[13]生物工程中的仪器设备. 尤崇杓,蒋士强. 1989

[14]利用噬菌体随机肽库筛选新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶模拟表位. 姜宁朋,胡北侠,张秀美,李建亮,黄艳艳,徐栋,崔言顺. 2008

[15]麦长管蚜ELISA检测体系的建立. 高书晶,庞保平,陈正贤. 2008

[16]高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒间接免疫荧光鉴别方法的建立. 陈仕龙,黄梅清,林天龙,江斌,庄向生,陈少莺. 2009

[17]植物病原原核微生物快速检测新技术的应用现状. 徐平东,柯冲. 1991

[18]植酸酶单克隆抗体的制备及鉴定. 胡骁飞,魏凤仙,李青梅,职爱民,王方雨,孙亚宁,柴书军,付晓鹤. 2012

[19]伪狂犬病毒单克隆抗体的特性和应用. 程由铨,李怡英,吴平,林天龙,庄向生,黄宁. 1992

[20]抗莱克多巴胺单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定. 张海棠,王自良,邓瑞广,钟华,范国英. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序