猪肺炎支原体P36蛋白间接ELISA检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 祝永琴

作者： 祝永琴;冯志新;刘茂军;吴叙苏;邵国青

作者机构：

关键词： 猪肺炎支原体;P36蛋白;IgG;间接ELISA

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2010 年 26 卷 05 期

页码： 97-102

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将已构建的含有猪肺炎支原体P36基因的酵母表达质粒pPICZα-A-P36在酵母菌X-33里进行表达,并对表达的蛋白进行Western-blotting鉴定。将其作为包被抗原包被酶标板,用羊抗猪IgG-HRP作为酶标二抗,并分别对抗原浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度以及作用时间等进行了优化,最终建立了稳定的抗猪肺炎支原体IgG的间接ELISA检测方法。应用该方法检测猪鼻支原体、猪絮状支原体、猪圆环病毒阳性血清等都是阴性,说明该方法具有良好的特异性。批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均小于8%,说明该方法具有良好的重复性。利用该方法检测猪肺炎支原体活疫苗(168株)免疫猪血清中IgG的动态变化,结果表明,免疫猪血清中的IgG在免疫后分泌逐渐增加,直至免疫后8周,而经强毒攻毒后抗体滴度明显增高。

分类号： S858.282.43

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