小反刍兽疫病毒N基因在大肠杆菌中的表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贾凤芹

作者： 贾凤芹;李刚;李伟;范晓娟;张坤

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;N基因;原核表达

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2009 年 17 卷 02 期

页码： 195-200

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参照GenBank中小反刍兽疫病毒((Peste des petits ruminants virus,PPRV)N基因序列(Nigeria/75/1)(1578bp)设计了1对添加EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点的引物,对从奥地利引进的pCI-neo-PPRN质粒进行PCR扩增,克隆至pGM-T载体,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)TOP10感受态细胞,获得重组质粒pGM-T-PPRN。将重组质粒经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切的产物插入原核表达载体pET-32a(+),构建原核表达质粒pET-PPRN,将其转化进BL21(DE3)感受态细胞中后用IPTG诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳和Western blot分析,结果表明,小反刍兽疫病毒N基因在BL21(DE3)成功表达。所表达融合蛋白的相对分子质量约为80kD,并能被组氨酸单抗、PPRV标准阳性羊血清及PPRV疫苗免疫羊血清所识别。

分类号： S852.65

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