文献类型： 中文期刊
第一作者： 韩元
作者： 韩元;许强;杨学财;李有全;郭鹏飞;关贵全;刘军龙;刘爱红;刘光远;李禤;殷宏;罗建勋;蔡葵蒸
作者机构：
关键词： 吕氏泰勒虫;TlSP基因;跨膜区;原核表达;反应原性分析
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2017 年 12 期
页码： 1503-1509
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 提取吕氏泰勒虫裂殖子的总RNA,采用RT-PCR方法扩增其表面蛋白TlSP(Theileria luwenshuni surface protein)基因的cDNA片段,结合生物信息学方法,对TlSP蛋白抗原表位和跨膜区进行预测,设计表达引物,分别扩增得到TlSP全长及逐一去除跨膜区的4个片段,并将其分别克隆至pET-30a原核表达载体,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S感受态细胞进行诱导表达,并对融合蛋白的反应原性进行分析。结果表明,TlSP融合蛋白的N端具有较好的抗原性,而在C端存在3个跨膜区:185~207 aa、228~250 aa和255~277 aa;SDS-PAGE结果表明,只有去除全部跨膜区的重组载体可成功表达。Western-blot分析表明,TlSP融合蛋白能与吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫及环形泰勒虫阳性血清发生反应,而与巴贝斯虫、羊无浆体阳性血清无交叉反应。本研究为今后TlSP候选亚单位疫苗的研究奠定了基础。
分类号： S852.72
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