猪α干扰素在毕赤酵母中的高效表达和纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张存

作者： 张存;叶伟成;王一成;袁秀芳;刘蔓雯;张燕

作者机构：

关键词： 猪α干扰素;毕赤酵母;分泌表达

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2010 年 22 卷 01 期

页码： 6-9

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研制新型的猪用抗病毒制剂,开展了猪α干扰素(PoIFNα)在毕赤酵母中的表达和产物纯化研究。将PCR扩增的PoIFNα基因插入pPIC9k的SnaBⅠ和EcoRⅠ位点,构建了表达转移载体pPIC9k/PoIFNα;经酶切和测序鉴定,转移载体构建正确。pPIC9k/PoIFNα以限制性内切酶SalⅠ线性化后电转化毕赤酵母GS115菌株,经抗性筛选获得4拷贝PoIFNα基因的重组菌株GS115/PoIFNα;重组菌株经BMMY培养基诱导后上清中有目的蛋白,表达量达136mg/L。表达产物经过SP-Sepharose阳离子交换层析,可以得到纯度较高的rPoIFNα,纯化产物在MDBK细胞上抑制VSV的活性高达2.27×108U/mg。

分类号： Q78

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