小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达及免疫原性测定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李丹

作者： 李丹;宋浩志;高维崧;刘兴健;张志芳;李轶女

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫病毒;血凝素蛋白;疫苗;大肠杆菌表达系统

期刊名称： 生物技术进展

ISSN： 2095-2341

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 770-776

摘要： 小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus,PPRV）引起的急性、接触性传染病,对我国的畜牧业发展造成了严重的影响,目前主要通过疫苗进行防控。为检测PPRV主要抗原蛋白血凝素（hemagglutinin,H）蛋白的免疫原性,从GenBank数据库中查找了近年来公布的H蛋白氨基酸序列,选择1条符合我国流行趋势的序列,对其基因序列进行优化合成后克隆至pET28a载体上。筛选出表达量高的Rosetta（DE3）菌株进行表达,表达产物经SDS-PAGE、Western Blot及质谱分析鉴定。经镍柱亲和层析纯化出单一H蛋白,取20μg与佐剂混合后免疫小鼠,收集血清进行抗体效价检测,结果显示,血清中H蛋白抗体滴度在二免2周时达到1∶6 400,表明H蛋白具有较好的免疫原性。进一步对二免2周时血清进行中和抗体检测显示,小鼠血清对PPRV疫苗株具有中和效应,中和效价不超过1∶40。研究结果对H蛋白用于PPRV疫苗的研发提供了理论依据。

分类号： S852.65

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