Mechlppdk基因在木薯中的表达分析及RNA干扰载体构建和遗传转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王海燕

作者： 王海燕;陈新;周新成;沈旭;孔华;王文泉

作者机构：

关键词： 丙酮酸磷酸双激酶;表达谱;RNA干扰;表达载体;木薯;遗传转化;脆性愈伤;转基因苗;PCR鉴定

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2021 年 017 期

页码： 19-25

收录情况： CSCD

摘要： 本研究为了明确丙酮酸磷酸双激酶（ppdk）在木薯中的表达谱,创制Mechlppdk的干扰株系,以期为Mechlppdk的功能研究提供材料。本研究以栽培型木薯Arg7为材料,用qPCR的方法分析Mechlppdk在木薯根、茎、叶中的表达谱;采用RNA干扰的方法,构建Mechlppdk的干扰载体,并遗传转化木薯脆性愈伤,经木薯再生体系获得转基因苗,在添加抗生素的培养基上进行生根筛选,经PCR鉴定获得Mechlppdk的干扰株系。用qPCR的方法鉴定Mechlppdk在干扰株系的表达情况。结果表明,Mechlppdk在木薯叶片中表达量最高,达到管家基因的50%。在Mechlppdk的转运肽区,选取1个保守区段设计引物,构建RNA干扰表达载体pART27-Mechlppdki,将表达载体转化农杆菌LBA4404,侵染木薯脆性胚愈伤,获得阳性转基因木薯苗7个株系。通过qPCR分析发现各株系Mechlppdk转录本有不同程度的降低。通过以上分析表明本研究获得了干扰效率较高木薯Mechlppdk干扰株系,将为解析木薯Mechlppdk的功能提供研究材料。

分类号： S533

  • 相关文献

[1]小菜蛾UDP-N-乙酰氨基葡萄糖焦磷酸化酶基因的克隆、表达及功能研究. 李恒,田厚军,林硕,陈艺欣,魏辉,陈勇. 2024

[2]RNAi表达载体对avUCP基因表达的抑制作用. 仲明,张宏福,董枫岚,王润平,刘燕,杨琳. 2007

[3]草莓NCED基因正反义表达载体和RNAi载体的构建. 朱海生,陈敏氡,李严曼,温庆放. 2012

[4]白藜芦醇合酶基因表达载体构建及对马铃薯的遗传转化. 付洪冰,刘丽艳,刘昭军,盛万民,王珣,李铁,王俊河,杨学,王秀君,赵曦. 2009

[5]中国水仙NtPLATZ1正、反义植物表达载体构建及转化烟草的研究. 王伟英,李海明,戴艺民,林江波. 2017

[6]高粱SbCYP79A1基因表达载体的构建及转化玉米研究. 李金红,霍岩,付莉,翁倩,陶承光,史振声. 2018

[7]抗草甘膦基因表达载体的构建及对玉米的遗传转化. 李敬娜,刘亚,李翔,袁潜华,赵久然. 2010

[8]小麦TaMyb2基因转化拟南芥表达载体的构建与遗传转化. 王爱萍,景蕊莲,杨武德,董琦. 2008

[9]小豆组织再生体系的建立及遗传转化. 陈新,陈华涛,万建民,翟虎渠. 2011

[10]扩张蛋白Swollenin基因香菇表达载体构建及其初步转化. 刘岩,姚强,宫志远,高兴喜,韩建东,任鹏飞,张雪梅,任海霞,李瑾,曲玲. 2011

[11]植物遗传转化表达载体研究进展. 刘亚,李敬娜,任雯,李翔. 2011

[12]木薯PEPC基因家族成员鉴定及表达分析. 李相辰,沈旭,周新成,陈新,王海燕,王文泉. 2022

[13]木薯MeHDS2基因的克隆与分析. 王树昌,于晓玲,阮孟斌,彭明. 2014

[14]单子叶植物RNA干扰和过表达Gateway载体的构建. 毕惠惠,王根平,王成社,夏兰琴. 2013

[15]利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究. 朱云,樊娜娜,于耀华,张柏顺,杨煜,晁祥建,郭宝太,金黎平,郭晓,李广存. 2012

[16]百合AGPase基因RNAi载体构建及遗传转化研究. 张进忠,孙嘉曼,李朝生,刘挺燕,范燕萍. 2018

[17]单子叶植物RNA干扰和过表达Gateway载体的构建. 毕惠惠,王根平,王成社,夏兰琴. 2012

[18]木薯组织培养和遗传转化研究进展. 姚庆荣,郭运玲,郭安平. 2008

[19]影响根癌农杆菌介导的木薯遗传转化因素分析. 姚庆荣,郭运玲,孔华,贺立卡,郭安平. 2012

[20]硝酸银对根癌农杆菌介导的木薯遗传转化的影响. 郭运玲,尹奇,孔华,黄启星,左娇,贺立卡,郭安平. 2013

作者其他论文 更多>>

微信小程序