Pena1表位抗原多克隆抗体的制备及鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 赵杰

作者: 赵杰;高美须;潘家荣;王志东;兰丽平;睢珂;许舒婷;刘超超;牟慧

作者机构:

关键词: Pena1;表位多肽抗原;多克隆抗体;间接竞争ELISA;免疫印迹

期刊名称: 中国农业科学

ISSN:

年卷期: 2013 年 15 期

页码: 3191-3198

收录情况: CSCD

摘要: 【目的】建立一种识别、检测致敏蛋白的新方法。【方法】Pena1为虾中主要的致敏蛋白,从其5个主要IgE结合区中选择一段具有代表性的(85—105位)含21个氨基酸的多肽序列,进行化学合成,将多肽分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,制得免疫原和包被原,免疫原免疫新西兰纯种白兔得到多克隆抗体。以刀额新对虾蛋白、卵清蛋白、花生蛋白和牛奶蛋白为样品,免疫印迹鉴定多克隆抗体对刀额新对虾中Pena1蛋白的特异性。【结果】经Ellman试剂测定多肽与KLH、BSA的偶联比分别为12﹕1和8﹕1。间接非竞争ELISA测定多克隆抗体的效价达1.024×106,间接竞争ELISA(i...

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