文献类型： 中文期刊
第一作者： 王国超
作者： 王国超;赵亚茹;张忠辉;张玉龙;白鸽;耿抒贤;樊洁;杨吉飞;关贵全;殷宏;罗建勋;牛庆丽
作者机构：
关键词： 非洲猪瘟病毒;pD205R蛋白;原核表达;多克隆抗体
期刊名称： 畜牧兽医学报
ISSN： 0366-6964
年卷期： 2023 年 005 期
页码： 2042-2049
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）pD205R蛋白参与病毒基因的转录，属于ASFV RNA聚合酶，且与真核生物RNA聚合酶II RPB5亚基相似，为深入了解pD205R结构，功能及病毒与宿主之间的作用机制。利用DNAStar、MEGA7.0对GenBank中公布的不同毒株的ASFVD205R基因序列进行分析，利用ExPASy、GOR4、AlphaFold软件对该蛋白的理化性质及结构预测进行分析，并对其原核表达和制备抗pD205R蛋白多克隆抗体。结果显示：在不同基因型间D205R基因高度保守；利用ExPASy在线软件预测pD205R蛋白理化性质其分子式为C1088H1712N278O295S8,属亲水性蛋白，稳定性差；二级结构及三级结构预测显示，α螺旋是其主要结构形式，占比为35.12%;同时以ASFV-CN/SC/2019毒株基因组为模板，构建原核表达质粒pET-28a-D205R并转入Rosetta （DE3）感受态细胞，经IPTG诱导重组蛋白成功表达，大小为23.3 ku。获得的蛋白经镍柱亲和层析纯化，Western blot鉴定可与ASFV阳性血清发生特异性反应。免疫新西兰大白兔制备的多克隆抗体效价达到1∶51 200,Western blot和IFA结果显示制备的多克隆抗体够特异性的识别ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞中表达的天然pD205R蛋白，为进一步研究D205R基因的功能及其在宿主与病毒互作中的作用奠定了基础。
分类号： S852.651
- 相关文献
[1]非洲猪瘟病毒A137R蛋白的表达动力学与亚细胞定位分析. 孙茂文,周萍萍,王涛,李永锋,潘力,韩玉,孙元,杨玉莹,仇华吉. 2021
[2]非洲猪瘟病毒CP312R基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备与应用. 刘佳晨,郭子强,陈金霞,曹云雷,童武,乔思娜,刘长龙,赵冉,郑海红,童光志,李丽薇,高飞. 2024
[3]非洲猪瘟病毒MGF360-13L蛋白的原核表达及多克隆抗体制备. 陈世钰,蒋亚君,鑫婷,崔帅,王洋,郭晓宇,贾红,朱鸿飞. 2024
[4]非洲猪瘟病毒pNP419L蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 吕欣倩,牛庆丽,樊洁,杨吉飞,赵亚茹,张忠辉,杨赛霞,敬梦瑶,耿抒贤,关贵全,刘志杰,殷宏. 2021
[5]非洲猪瘟病毒pK145R蛋白的原核表达及抗血清的制备. 张涛清,张元峰,赵改红,郑君,翁长江. 2023
[6]非洲猪瘟病毒UBCv1的原核表达及多抗制备. 蒋思文,房立春,冯泽新,焦鹏,王玥超,梁艳,史东宇,陈青. 2021
[7]非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 王西西,吴映彤,吴竞,陈鸿军,郭晓宇,朱鸿飞. 2018
[8]非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 王西西,吴映彤,吴竞,陈鸿军,郭晓宇,朱鸿飞. 2018
[9]猪CD1d蛋白多克隆抗体的制备及应用. 刘传霞,陈欣,王晓,李雪雯,李婷婷,翁长江,郑君. 2024
[10]非洲猪瘟病毒p30蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备. 黄剑,徐晶晶,程雪飞,李国新,高飞,童光志. 2020
[11]非洲猪瘟病毒亲核结构蛋白p10可溶性表达及多克隆抗体制备. 陈蓉,赵琳,王婉,谢星,王菁菁,郝飞,白昀,张磊,袁厅,熊琪琰,邵国青,赵东明,冯志新. 2021
[12]非洲猪瘟病毒p30-54融合蛋白基因的构建、表达及其多克隆抗体制备. 李杰,张星星,郭晶,孟庆玲,乔军,张国武,王晓婷,李妍,才学鹏. 2018
[13]非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定. 乔思娜,赵款,刘佳晨,李国新,童武,周艳君,赵冉,童光志,高飞,李丽薇. 2023
[14]非洲猪瘟病毒pE248R蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备. 杜楠楠,陈金霞,曹云雷,张宽,童武,李丽薇,赵冉,童光志,高飞. 2024
[15]非洲猪瘟病毒B318L蛋白的多克隆抗体的制备及应用. 刘晓红,刘宏扬,叶光强,焦爽,宿志民,黄丽,翁长江. 2023
[16]非洲猪瘟病毒p72蛋白原核表达及多克隆抗体的制备. 曹云雷,高飞,李国新,姜一峰,郑浩,童武,黄剑,童光志. 2022
[17]非洲猪瘟病毒A137R蛋白多克隆抗体的制备与应用. 向志达,张涛清,张元峰,黄丽,杨玉莹,翁长江. 2021
[18]非洲猪瘟病毒p54蛋白原核表达及多克隆抗体的制备. 赵改红,张涛清,向志达,张元峰,李江南,翁长江. 2023
[19]非洲猪瘟病毒p72蛋白N末端的原核表达及间接ELISA检测方法的建立. 姜林林,宋帅,蔡汝健,蒋智勇,李艳,勾红潮,楚品品,李春玲. 2021
[20]非洲猪瘟病毒多表位融合蛋白P72的构建、表达及免疫学特性研究. 郭晶,李重阳,孟庆玲,乔军,伍晔晖,王立霞,马帅,才学鹏. 2019
作者其他论文 更多>>
-
鸡传染性法氏囊病病毒VP5的原核表达、多抗制备及初步应用
作者：韩金泽;牛鑫鑫;王国栋;葛成菲;张玉龙;黄萌萌;许萌萌;于航博;刘润杭;韩京哲;吴子文;于晓雪;高玉龙;李留安;祁小乐
关键词：传染性法氏囊病病毒;VP5;表达;多抗;应用
-
非洲马瘟病毒VP5蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体制备
作者：范亚亚;王轩莹;户鑫兵;田占成;关贵全;罗建勋;殷宏;郑玉姝;独军政
关键词：非洲马瘟病毒;VP5蛋白;杆状病毒表达系统;多克隆抗体;免疫荧光
-
多房棘球绦虫感染的检测方法研究进展
作者：游杰;李立;孙继文;詹舒懿;逯文颖;周蜓蜓;殷宏;贾万忠;闫鸿斌
关键词：多房棘球绦虫;犬科动物;粪DNA;粪抗原;分子生物学检测;免疫学诊断
-
邓氏巴贝斯虫血清学诊断抗原的筛选
作者：年月丽;王锦明;张尚弟;张卫军;关贵全;殷宏;尤崇革
关键词：邓氏巴贝斯虫;巴贝斯虫病;分泌性抗原;蛋白质组学;诊断抗原
-
敲低多房棘球蚴let-7-5p可抑制BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞极化和虫体生长
作者：王立群;吴易璇;蒲桂婷;曹珊菱;王得先;刘婷丽;李红;AMUDA Tharheer Oluwashola;郭小腊;殷宏;骆学农
关键词：多房棘球蚴;emu-let-7-5p;腹腔巨噬细胞极化;虫体生长
-
DNA损伤修复酶OGG1/MTH1抑制剂对非洲猪瘟病毒复制的影响
作者：张小强;樊洁;杨吉飞;付竞生;吴梦丽;邵程祥;关贵全;殷宏;刘志杰;牛庆丽
关键词：非洲猪瘟;抗病毒药物;碱基切除修复;8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1 (OGG1);8-羟基鸟嘌呤核苷酸酶1 (MTH1)
-
荧光素酶免疫吸附法高灵敏检测蓝舌病病毒抗体方法的建立
作者：张鸿歌;田占成;独军政;王琼洁;康棣;户鑫兵;张忠辉;关贵全;殷宏
关键词：蓝舌病病毒;VP7蛋白;荧光素酶免疫吸附试验;c-ELISA;血清学检测
