橙汁腐败酵母菌的分子鉴定及其形态特征分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭冬琴

作者： 郭冬琴;戴木兰;周志钦;焦必宁;杨晓红

作者机构：

关键词： 腐败橙汁;酵母菌;分子鉴定;形态分析

期刊名称： 食品科学

ISSN： 1002-6630

年卷期： 2012 年 33 卷 09 期

页码： 131-137

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的:结合多种酵母菌鉴定方法,分析腐败橙汁中酵母菌的种类,为快速检测和控制商品橙汁中酵母菌污染奠定基础,也为酵母菌种类的快速鉴定提供参考。方法:以分离自腐败橙汁的8株酵母菌株为材料,观察菌落和细胞形态。用引物ITS1/ITS4扩增菌株5.8S rDNA及其ITS间隔区(5.8S-ITS),对扩增产物用HhaⅠ、HaeⅢ和HinfⅠ进行限制性酶切片段多态性(RFLP)分析和测序;用引物NL1/NL4扩增26S rDNA D1/D2区并测序。结果:菌落特征观察将菌株初分为6组,细胞学观察粗分为3组,分子方法都分成4组。用限制性内切酶HhaⅠ、HaeⅢ和HinfⅠ对5.8S-ITS区产物进行RFLP分析,观察到4种不同的图谱类型。5.8S-ITS区和26S rDNA D1/D2区的序列分析结果相似,8株分离菌与GenBank中的4种酵母菌参考菌株序列一致性达99%以上。分离株与参考菌株以两区序列构建的NJ系统树都分成4枝:Y1与克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri),Y12-3、Y18-1与发酵毕赤酵母(Pichiafermentans),Y22、Y23、Y26和Y56与Meyerozyma guilliermondii,Y47与Wickerhamomyces anomalus分别聚为一枝。结论:结合形态分析和核酸分析,将8株腐败橙汁分离菌鉴定为P.kluyveri var.kluyveri、P.fermentans、M.guilliermondii和W.anomalus 4个种,其中M.guilliermondii在腐败橙汁中首见报道;ITS-RFLP分析、26S rDNAD1/D2区测序与菌株形态特征结合能有效鉴定酵母菌,核糖体DNA分析可鉴定酵母到生物学种,菌落形态特征可反映种以下的遗传差异,因此,采用分子方法鉴定时不能忽视形态特征分析的重要性。

分类号： TS255.44

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