抗磺胺二甲氧嘧啶VHH抗体噬菌体库的构建和鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贺东阳

作者： 贺东阳;张齐;张星星;钟发刚;张小莺;王金泉

作者机构：

关键词： 磺胺二甲氧嘧啶（SDM）;单域重链抗体（VHH）;噬菌体展示技术

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN：

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 48-53

收录情况： 北大核心

摘要： 旨在制备抗磺胺二甲氧嘧啶（SDM）驼源单域重链（VHH）抗体,用于检测动物源性食品中SDM的残留。采用重氮化法,SDM分别与牛血清白蛋白（BSA）和鸡卵清蛋白（OVA）偶联,合成人工免疫原（SDM-BSA）和包被抗原（SDM-OVA）。用SDM-BSA免疫骆驼,在第5次免疫后1周采集骆驼外周血液,分离外周血淋巴细胞,提取RNA,RT-PCR扩增VHH基因,将VHH基因插入pCANTAB-5E噬菌粒载体,构建双峰驼单域重链抗体库。经本实验室前期测定其库容为1.08×105 CFU,阳性率为96.6%。利用噬菌体展示技术经过4轮生物淘选,筛选获得特异性表达抗SDM抗体的重组噬菌体。结果:构建了SDM的驼源VHH抗体库,经生物淘选及phage ELISA检测获得了特异性的重组噬菌体。通过4轮生物淘选,获得了能够与SDM-OVA抗原有明显结合力且能够特异性表达抗SDM抗体的重组噬菌体,为后期检测SDM在动物源性食品残留奠定了良好的基础。

分类号： S859.84

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