文献类型： 中文期刊
第一作者： 付宁宁
作者： 付宁宁;肖长广;陈梦莉;邱亚峰;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;马志永;魏建超
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;N蛋白;细胞系;稳定表达;慢病毒载体
期刊名称： 畜牧与兽医
ISSN： 0529-5130
年卷期： 2023 年 55 卷 012 期
页码： 105-110
收录情况： 北大核心
摘要： 旨在通过慢病毒表达系统构建稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的Marc-145细胞系.以PRRSV SH1株感染性克隆质粒为模板,通过PCR扩增N基因,并将其克隆到慢病毒载体中,获得重组慢病毒质粒pSin-Ires-Puro-N,将重组质粒pSin-Ires-Puro-N与辅助质粒psPAS2、pMD2.G、pRSV-Rev共转染293T细胞进行慢病毒包装,获得表达N蛋白的重组慢病毒颗粒并将其感染Marc-145细胞,嘌呤霉素初步筛选阳性细胞,筛选几代后的细胞采用有限稀释法和终点稀释法获得稳定表达N蛋白的Marc-145细胞系.通过PCR鉴定表明细胞系中存在N蛋白基因,通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot试验验证N蛋白能在细胞系中能稳定表达.本研究成功构建了稳定表达PRRSV N蛋白的Marc-145细胞系,为研制PRRSV新型复制缺陷型疫苗奠定基础.
分类号： S852.651
- 相关文献
[1]慢病毒介导过表达端粒酶逆转录酶的人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建. 曾飒,秦晓东,何祥一,车春晓,张潇,解斯羽,孙贵军,王立鹤. 2016
[2]稳定表达ATP5a细胞系的建立. 闫浩鑫,李明蔚,吴洋,郭龙军,冯力. 2024
[3]p53基因表达沉默的稳定Vero细胞系的建立及特性分析. 刘超,邱亚峰,沈阳,刘庆伟,马志永. 2010
[4]猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定. 米立娟,吕宗吉,张守峰,刘晔,王永志,扈荣良. 2012
[5]猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白与BCCIP蛋白相互作用的鉴定. 尹曼曼,郭东伟,刘琴芳,张枫,张利杰,李江南,翁长江. 2013
[6]PRRSV N与GP5蛋白抗原表位的串联表达及其间接ELISA检测方法的建立. 陈如敬,周伦江,吴学敏,车勇良,王晨燕,王隆柏,黄晓凤,严山,刘玉涛,魏宏. 2017
[7]北美型猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫层析试纸条的研制及初步应用. 李宛生,李敏华,张洪亮,李超,许浒,付军,龚帮俊,郭镇洋,刘建波,彭金美,周国辉,王倩,田志军. 2022
[8]猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白与宿主细胞DDX5蛋白相互作用研究. 刘欢,黄勤锋,张文超,姜一峰,杨莘,高飞,周艳君,童光志. 2017
[9]美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 欧云文,王勤,马炳,马小元,代军飞,贾宁,丁耀忠,张永光,张杰. 2017
[10]猪繁殖与呼吸综合征病毒SX-1株N蛋白单克隆抗体的制备. 丛晓燕,吴家强,李俊,时建立,杜以军,孙文博,尹斐斐,谷琳,王金宝. 2011
[11]一株PRRSV N蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定. 李敏华,王倩,田志军,金涛. 2019
[12]猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体的制备. 刘欢,姜一峰,张文超,杨莘,周艳君,黄勤锋,童光志. 2017
[13]表达PRRSV强弱毒Nsp2的Marc-145细胞系的建立及Nsp2蛋白对PRRSV复制的影响. 王凤雪,刘准,温永俊,冷雪,李真光,武华. 2012
[14]腺病毒介导的人端粒酶反转录酶牙周膜细胞系的建立. 孙贵军,秦晓东,王世琴,胡慧珍,陆笑颜,金佳佳,吴生荣,何祥一. 2019
[15]GUA基因在梨转化植株中的稳定表达. 孙清荣,孙洪雁,赵衍,HAMMOND Rosemarie,DAVIS Robert. 2008
[16]稳定表达小反刍兽疫病毒受体Nectin-4的MDBK细胞系的建立. 杨侃侃,张成,王元红,殷冬冬,俞赵荣,刘光清,朱杰,李刚,赵长城,李永东,王勇. 2018
[17]牛朊蛋白在CHO/dhfr-细胞中的稳定表达. 丁耀忠,张杰,刘永生,陈豪泰,曾巧英,马丽娜,马艳平,杨生海,殷宏. 2009
[18]稳定表达3种猪腹泻病毒嵌合抗原的CHO细胞系构建与鉴定. 宋旭,赵永祥,范宝超,郭容利,李基棕,刘静,李彬. 2023
[19]稳定表达PDCoV-S和RBD蛋白的293T细胞系构建与免疫原性评价. 肖丽,赵淑庆,袁雪松,范丽原,易鑫,陈琢琦,李彬,李基棕,主性. 2024
[20]猪流行性腹泻病毒S蛋白外分泌信号肽筛选及稳定表达细胞系的构建. 王传红,宋旭,刘诗雨,张格格,徐红,王祎,赵永祥,郭荣利,范宝超,胡朝阳,李彬. 2024
作者其他论文 更多>>
-
上海水牛生理生化指标的测定和分析
作者：薛云;周瑾;杨显超;刘珂;张文刚;戴建军;陆雪林;章伟建
关键词：上海水牛;生理指标;血液生理指标;血液生化指标
-
三种复方植物精油驱蚊效果实验室观察研究
作者：李昱昊;刘昱男;张妍;管志欣;张俊杰;肖长广;李宗杰;李蓓蓓;邵东华;刘珂;邱亚峰;马志永;孙尧;魏建超
关键词：植物精油;驱避剂;白纹伊蚊;有效保护时间
-
PRRSVNsp4基因突变株对β2M表达的影响
作者：康磊;刘珂;王建忠;尹才;邱亚峰;魏建超;李蓓蓓;邵东华;李宗杰;粟硕;马志永
关键词：PRRSV;Nsp4;β2M;反向遗传平台;突变毒株
-
基因Ⅰ/Ⅴ型日本脑炎嵌合病毒的构建及其生物学特性和致病性研究
作者：夏琦琦;张俊杰;杨扬;张妍;赵秋华;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;邱亚峰;魏建超;马志永
关键词：日本脑炎病毒;基因型;反向遗传技术;嵌合病毒;半数致死量
-
基于SNP芯片分析新浦东鸡的遗传多样性和遗传结构
作者：齐丽娜;陆雪林;杨凯旋;周瑾;李先玉;刘珂;张文刚;顾欣;章伟建
关键词：新浦东鸡;SNP芯片;遗传多样性;群体遗传结构
-
乙型脑炎病毒结构蛋白PrM单克隆抗体的制备和分析
作者：陈梦莉;谢丰玉;张彤;郑家杨;魏建超;李宗杰;李蓓蓓;邱亚峰;马志永;邵东华;刘珂;冯秀丽
关键词：日本乙型脑炎病毒;PrM/M;单克隆抗体
-
非洲猪瘟病毒EP364R蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定
作者：杨扬;张妍;张俊杰;管志欣;李昱昊;孙卿;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华;邱亚峰;魏建超;马志永
关键词：非洲猪瘟病毒;EP364R;杆状病毒表达;免疫原性
