胸腺素家族多肽在大肠杆菌中的表达
文献类型: 中文期刊
第一作者: 魏雪
作者: 魏雪;刘淑君;辛凤姣
作者机构:
关键词: 胸腺素;重组表达;大肠杆菌;融合表达标签
期刊名称: 核农学报
ISSN:
年卷期: 2021 年 006 期
页码: 1313-1321
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为提高胸腺素(又名胸腺肽,thymosin)的体外表达效率,本研究采用设计融合标签的方法对胸腺素α1和β4 (Tα1,Tβ4)进行体外重组表达,通过超高效液相色谱-飞行时间质谱联用(LC/MS)法,对融合蛋白的完整分子量进行验证,利用反相超高效液相色谱法对不同表达载体的单位表达量进行测定。结果表明,A18-KEKE、DKL6K两种融合标签能够高效地表达Tα1和Tβ4。LC/MS结果表明,所有被测样品的过表达条带中均含有融合标签的目的多肽,且带有融合标签A18-KEKE的胸腺素的单位表达量达73~123 mg·OD-1·L-1。A18-KEKE、DKL6K 2种融合标签可以有效地促进胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)、胰高血糖素样肽-2 (GLP-2)、甲状旁腺激素(PTH 1-34)和糖依赖性胰样多肽(GIP)的表达,证实了这2种融合标签的广谱适用性。本研究成功筛选到了2种融合标签,可用于多种胸腺素家族多肽在大肠杆菌中的重组表达,且融合蛋白单位表达量较高,提高了胸腺肽类产品重组生产的效率,极大地降低生产成本,具有广泛的应用前景。
分类号: Q786
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