三种检测内源性基因修饰方法比较

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李炜杰

作者： 李炜杰;杨娇;何高明;王立民;皮文辉;周平

作者机构：

关键词： 基因组编辑;Surveyor核酸酶;T7 Endonuclease I;高分辨率熔解曲线(HRM)

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2016 年 32 卷 02 期

页码： 76-83

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得准确的突变信息,除直接测序外,实验初步确定了3种人工核酸酶生物学活性检测方法。利用Surveyor nuclease、T7E1(T7 Endonuclease 1)和HRM(High resolution melt),均以变性退火突变型和野生型DNA序列形成扭曲的双螺旋DNA(distorted duplex DNA)为基础的3种人工核酸酶生物学活性检测方法,确定目标位点是否发生突变。实验成功检测出作用于绵羊MNST基因第一外显子的CRISPR/Cas9和第三外显子的TALEN目标位点发生突变,并对3种检测方法的结果和特点进行了分析比较,得出3种检测方法的优缺点,为实验室分析确定细胞利用非同源末端连接修复DNA双链断裂结果提供参考。

分类号： Q78

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