文献类型： 中文期刊
第一作者： 黄双
作者： 黄双;王凤雪;温永俊;高维凡
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;Nsp2基因;原核表达
期刊名称： 动物医学进展
ISSN： 1007-5038
年卷期： 2014 年 03 期
页码： 15-18
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)TJ株在细胞克隆纯化后得到非结构蛋白2(Nsp2)缺失的致弱毒株TJM株,根据GenBank数据库中公布的PRRSV TJ株F3代全基因序列设计合成引物,采用RTPCR方法扩增了PRRSV TJM株缺失片段dNsp2,利用原核表达载体pGEX-6p-1构建重组质粒GSTdNsp2,将重组质粒转入大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,获得了可溶性表达的融合蛋白(GST-dNsp2)。经亲和柱层析纯化后,得到纯化的GST-dNsp2蛋白,含量1.6mg/mL。用PreScissionTM蛋白酶对融合蛋白GST-dNsp2进行解离,获得浓度为0.41mg/mL的目的蛋白dNsp2。对GST-dNsp2及dNsp2进行Western blot鉴定,证明表达的蛋白具有良好的反应性。本研究获得的GST-dNsp2及dNsp2为ELISA方法鉴别检测PRRSV TJ株与TJM株提供了基础资料。
分类号： S852.659.6
- 相关文献
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州PT分离株Nsp2基因克隆及序列变异分析. 周思旋,徐健,吴屿彤,史开志,徐洪忠,肖芳萍. 2014
[2]山东及周边部分地区猪繁殖与呼吸综合征病毒的变异与遗传演化分析. 胡栋,徐煜琳,朱迎春,赵情,王亭亭,庞恒,李传刚,于江,常维山,吴家强,彭军. 2019
[3]1株基因重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的新型变异和遗传进化分析. 胡栋,朱迎春,赵情,庞恒,李传刚,王亭亭,常维山,彭军,吴家强. 2021
[4]猪繁殖与呼吸综合征病毒WF-1株的分离鉴定及NSP2和ORF5基因的变异分析. 李坤,吴家强,张金强,李俊,于江,刘洋,张玉玉,刘少宁,王兆,周顺,王金宝. 2010
[5]猪繁殖与呼吸综合征病毒主要流行毒株检测方法的建立. 郭振华,陈鑫鑫,郭军庆,乔松林. 2017
[6]猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒Nsp2基因缺失株Jiangxi-3灭活疫苗免疫效果评价. 王旭荣,张彩勤,赵炳武,宋长绪. 2010
[7]PRRSV SX-1株的分离与NSP2和ORF5基因的克隆及变异分析. 张金强,吴家强,朱向福,于美芳,白华,孟斌,任素芳,王文志,王金宝. 2009
[8]猪繁殖与呼吸综合征病毒JX0708株的分离鉴定及其Nsp2基因的遗传变异分析. 贾怀杰,陈国华,房永祥,王晓霞,李小庆,莫斯科,瞿惠玲,景志忠. 2010
[9]2013年-2014年江西地区PRRSV分离株NSP2及ORF5基因的遗传变异分析. 李海琴,林娟,刘垒,季华员. 2015
[10]中国部分地区2005-2007年猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株ORF5基因和Nsp2基因遗传变异分析. 薛青红,张彦明,刘湘涛,郎洪武,邹敏,高金源,邓永. 2009
[11]PRRSV山西株ORF5和Nsp2基因序列分析. 姚敬明,刘文俊,罗甜甜,吴忻,王娟萍,孟帆,韩一超,樊振华,米瑞娟. 2014
[12]我国苏皖地区PRRSV Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析. 李彬,何孔旺,温立斌,俞正玉,茅爱华,王小敏,张雪寒,郭容利,倪艳秀,周俊明,吕立新. 2011
[13]PRRSV分离株Nsp2基因和ORF5基因的遗传变异分析. 王剑非,孙建全,张金强,迟小伟,刘杰,丛晓燕,时建立,李俊,吴家强. 2011
[14]猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP12蛋白的表达与鉴定. 张文超,虞凌雪,姜一峰,高飞,黄勤峰,李丽薇,李慧春,陈鹏飞,杨德强,刘欢,童光志,杜雅楠,周艳君. 2018
[15]截短的猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的原核表达. 戚亭,崔尚金,张超范. 2008
[16]美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化. 丛晓燕,李俊,吴家强,张祯涛,赵鸿雁,曹帅,王文志,王金宝. 2006
[17]PRRSV受体CD163与Marc-145细胞蛋白的相互作用. 李红,刘成倩,易建中. 2016
[18]猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因不同编码区的表达和反应原性鉴定. 周宏专,徐福洲,王金洛,杨新建,史爱华,杨兵. 2007
[19]猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株ORF6基因的克隆与原核表达研究. 刘永宏,刘月焕,王凤龙,韩春华,林健,王金玲,杨龙峰,赵丽,张秋雨,张永富. 2009
[20]猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白基因的克隆及原核表达. 罗胜军,黄忠,周秀蓉,贾春铃,袁洁,魏文康. 2010
作者其他论文 更多>>
-
牛病毒性腹泻病毒E2基因生物信息学分析及可溶性表达
作者：赵洪哲;李新培;范峻豪;宋前进;张静;关平原;温永俊
关键词：牛病毒性腹泻病毒;囊膜结构蛋白E2;原核表达
-
牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其应用
作者：赵洪哲;范峻豪;李新培;王昊;关平原;温永俊
关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV);杂交瘤细胞;单克隆抗体(MAb);直标荧光抗体
-
猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2蛋白纳米抗体的筛选 及其鉴定
作者：宋欢;孙明霞;尹坤;温永俊;刘永刚;蔡雪辉
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;纳米抗体;非结构蛋白2
-
狂犬病病毒感染小鼠原代神经元细胞模型的建立
作者：尹坤;马子鹏;李伊铭;孙雨茗;王昊;乌东高娃;孙娜;程世鹏;王凤雪;温永俊
关键词：狂犬病病毒;原代神经元细胞;感染模型
-
牛病毒性腹泻病毒致病机制研究进展
作者：李新培;周伟光;关平原;程世鹏;温永俊
关键词：牛病毒性腹泻病毒;急性感染;经子宫或胎盘感染;持续性感染;黏膜病
-
酸马奶中一株具有高效抑菌活性的乳酸菌的分离与鉴定
作者：贾燕;宋前进;李新培;关平原;温永俊
关键词：乳酸菌;酸马奶;分离;鉴定;体外抑菌;抗菌
-
牛病毒性腹泻病毒鉴定及分型RT-PCR检测方法的建立
作者：李新培;朱洪伟;周伟光;关平原;程世鹏;温永俊
关键词：牛病毒性腹泻病毒;鉴定;分型;反转录-聚合酶链反应
