旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的表达及抗原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 盖文燕

作者： 盖文燕;李文卉;王鸿盛;姚菊霞;曲自刚;王艳华;张德林;付宝权

作者机构：

关键词： 旋毛虫;丝氨酸蛋白酶抑制剂;重组抗原;抗原性

期刊名称： 中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集

ISSN：

年卷期： 2009 年

页码： 1

收录情况： CSCD

摘要： 根据GenBank中旋毛虫丝氨酸蛋白酶抑制剂(TsSerPIN)基因序列设计引物,从中国河南猪旋毛虫分离株肌幼虫总RNA应用RT-PCR扩增获得目的基因片段,克隆到pMD-18T载体并测序鉴定。对重组质粒pMD-18T-TsSerPIN进行限制性酶切,获取目的基因片段后连接到表达质粒载体pET30a,构建重组表达质粒pET30a-TsSerPIN,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物,对表达产物纯化后用Wes...

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