稳定表达靶向BVDV shRNA细胞系的建立及其对BVDV复制的影响
文献类型: 中文期刊
第一作者: 范璐
作者: 范璐;王丽;史西保;樊剑鸣;王爱萍;张改平
作者机构:
关键词: RNA干扰;牛病毒性腹泻病毒;短发夹RNA;单克隆细胞系;复制
期刊名称: 河南农业科学
ISSN: 1004-3268
年卷期: 2014 年 43 卷 12 期
页码: 134-139
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研究靶向牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的shRNA对BVDV复制的影响,利用脂质体介导法将BVDV shRNA真核表达质粒pSGH1-sh1083和pSGH1-sh8235及对照质粒pSGH1转染MDBK细胞,通过G418抗性以及有限稀释法筛选获得BVDV shRNA单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235及对照细胞系subclonepshmock。通过观察其细胞病变效应(CPE)、测定TCID50及RT-PCR、流式细胞术检测BVDV shRNA细胞系对BVDV复制的影响。结果表明,与阴性对照组相比,单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235的细胞在感染BVDV 72h后CPE不明显,其TCID50低于阴性对照组;RT-PCR结果显示,单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235的细胞在感染BVDV后病毒E2基因的表达减弱;流式细胞术检测不同细胞系接毒24h后的结合率,单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235与病毒结合率分别为11.37%和11.51%,与对照组(20.25%)相比有所降低。综上,稳定转染BVDV shRNA的单克隆细胞系subclonepSGH1-1083和subclonepSGH1-8235对BVDV的复制具有抑制作用。
分类号: S852.65
- 相关文献
[1]猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF2~4特异siRNA的筛选及其抑制病毒复制效果的研究. 贺云霞,华荣虹,周艳君,安同庆,仇华吉,王云峰,童光志. 2007
[2]化学合成小干扰RNA分子高效抑制草鱼呼肠孤病毒复制. 李兵,范玉顶,李艳秋,徐进,周勇,曾令兵. 2009
[3]dsRNA对家蚕核型多角体病毒复制增殖的抑制效果. 夏定国,张国政,王文兵,赵巧玲,沈兴家,唐顺明,张业顺,韦亚东. 2006
[4]稳定表达水貂SLAM受体BHK-21细胞系的建立及初步应用. 冯广余,王建. 2018
[5]RNA干扰Gas2基因对低温胁迫下罗非鱼肾脏细胞系增殖及凋亡的影响. 杨长庚,文华,王美姿,陆星,蒋明,田娟,喻丽娟. 2019
[6]猪繁殖与呼吸综合征病毒shRNA和GP5及M蛋白重组腺相关病毒的制备. 邱燕,兰喜,李学瑞,殷相平,李宝玉,柳纪省,杨彬. 2013
[7]猪繁殖与呼吸综合征病毒3''-UTR碱基缺失对病毒复制影响的初步研究. 熊俊垚,赵款,于芳,杨勇博,田志军,蔡雪辉,安同庆. 2019
[8]CAML蛋白对流感病毒复制调控机制的初步研究. 孔凡迪,王广文,严娅,温霞,王倩,赵玉辉,梁立滨,李俊平,李呈军,陈化兰,姜丽. 2021
[9]HgN2亚型禽流感病毒的序列分析及对哺乳动物致病力研究. 王金良,李旭勇,范俊,郭晶,邓国华,施建忠,陈化兰. 2013
[10]Sec62/Sec63复合物对乙型脑炎病毒在HEK-293细胞中复制影响的研究. 王晗,刘靖,钟杰,步志高,华荣虹. 2020
[11]MicroRNA-98促进猪圆环病毒2型在3D4/21细胞中的复制. 王小敏,徐祥兰,徐鹏,王兴开,惠禄露,范红结,何孔旺. 2020
[12]疱疹病毒的示踪技术:看到了什么?还能看到什么?. 王亚林,仇华吉,孙元. 2018
[13]Gα12蛋白抑制口蹄疫病毒在PK-15细胞上复制. 王志芳,张伟,杨帆,魏婷,郑海学. 2020
[14]HeLa细胞中泛素蛋白酶体系统对新城疫病毒复制的影响. 曲昱蓉,詹媛,仇旭升,谭磊,孙英杰,宋翠萍,丁铲. 2014
[15]两株EA H1N1亚型猪流感病毒在豚鼠体内的复制和传播能力评估. 陶世宇,王增,陈艳,杨焕良,孔晖晖,陈化兰,胡永浩. 2016
[16]H9N2亚型禽流感病毒的序列分析及对哺乳动物致病力研究. 王金良,李旭勇,范俊,郭晶,邓国华,施建忠,陈化兰. 2013
[17]不同H5N1亚型禽流感病毒在豚鼠体内的复制和传播能力评估. 张莹,高玉伟,邓国华,姜永萍,樊树芳,钟功勋,关云涛,陈化兰. 2010
[18]非洲绿猴FILIP1L真核表达质粒的构建及其抑制PEDV复制的研究. 汤学超,李运川,张雪寒,范宝超,朱雪蛟,周金柱,赵永祥,郭容利,李彬,李鹏. 2023
[19]禽网状内皮组织增生病病毒的分离鉴定及其体外复制研究. 邓小芸,祁小乐,高玉龙,高宏雷,秦立廷,高立,王笑梅. 2010
[20]弓形虫Tgcsp2基因敲除株的表型和毒力. 牛美容,李法财,谢世臣,聂兰碧,朱兴全,赵光辉. 2020
作者其他论文 更多>>
-
适宜工厂化栽培香菇菌株的筛选和评价
作者:孔昊;戴鑫;章炉军;张帅;宋秋潇;王丽
关键词:香菇;筛选评价;遗传多样性;农艺性状;灰色关联度分析
-
饲粮添加甜叶菊绿原酸对育肥猪生长性能、肉品质、免疫功能和抗氧化能力的影响
作者:唐佳希;邱月琴;叶国豪;叶秀峰;刘世龙;王丽;高开国;蒋宗勇;杨雪芬
关键词:甜叶菊绿原酸;育肥猪;生长性能;肉品质;免疫功能;抗氧化能力
-
天津地区口感番茄设施栽培技术
作者:李海燕;付婷婷;李冰;王帅;杨晓玲;王丽
关键词:天津地区;口感番茄;设施;栽培技术
-
自噬在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染中的作用机制研究进展
作者:李睿;梁跃;白杨;张桂悦;王楠楠;乔松林;张改平
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;感染;自噬;作用机制;抗病毒靶点
-
营养调控改善猪肉品质研究进展
作者:熊云霞;杨雪芬;蒋宗勇;王丽
关键词:猪;肉品质;营养调控
-
紫苏叶活性化学成分研究进展及其抗氧化与抑菌活性的物质基础
作者:安艳;欧巧明;王丽;梁婷玉;崔文娟;朱旭
关键词:紫苏叶;活性化学成分;抗氧化活性;抑菌活性;文献计量分析
-
不同牧草种植对黄河滩地土壤盐碱改良效果
作者:吴颖;李伟珍;李威;王丽;王巧玲;田英
关键词:牧草;混播;黄河滩地;盐碱地
