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犬瘟热病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

作者： 杨井泉 1 ; 韩猛立 2 ; 朱艳平 3 ; 黄新 2 ; 薄新文 2 ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆农垦科学院/新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室

3.新乡学院生命科学与技术系

关键词： 犬瘟热病毒;反转录巢式PCR;RT-PCR;NP基因

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2011 年 48 卷 06 期

页码： 1098-1103

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立一种犬瘟热病毒(CDV)RT-nested PCR检测方法。【方法】根据CDV弱毒株Onderstepoort的核衣壳蛋白(NP)基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性、重复性实验。【结果】特异性试验表明,该方法可以特异扩增出CDV NP基因片段,但从RNA病毒狂犬病病毒(RV)、DNA病毒犬细小病毒(CPV)以及正常Vero细胞中均未扩增出该条带。敏感性试验表明,RT-PCR可以扩增10-3稀释度的病毒RNA,而建立的RT-nested PCR可以扩增10-6稀释度的病毒RNA,后者的敏感性明显高于前者。重复性实验表明,不同情况下的3次重复实验,结果相同。用RT-nested PCR对石河子地区疑似感染CDV的病料进行检测,结果表明,该研究建立的RT-nested PCR不仅能有效的检测CDV感染,而且能够检测不同组织的样品。【结论】建立的RT-nested PCR检测方法,适用于动物CDV的快速诊断和流行病学调查。

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