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大豆疫霉根腐病抗性相关基因SDR1的克隆及功能分析

文献类型: 中文期刊

作者: 范素杰 1 ; 吴俊江 2 ; 陈晨 1 ; 王欣 1 ; 姜良宇 1 ; 王金生 2 ; 李文滨 1 ; 徐鹏飞 1 ; 张淑珍 1 ;

作者机构: 1.东北农业大学大豆研究所/大豆生物学教育部重点实验室

2.黑龙江省农业科学院大豆研究所/博士后工作站

关键词: 大豆;大豆疫霉根腐病;抗性相关基因;SDR1;遗传转化

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2012 年 45 卷 11 期

页码: 2139-2146

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】获得大豆疫霉根腐病抗性相关基因,为培育大豆抗病品种提供理论依据。【方法】在以大豆抗病品种绥农10构建的受疫霉菌诱导后差异表达的cDNA消减文库的基础上,选取文库中一条与其它植物的DR1基因具有较高同源性且上调表达的EST序列。通过RT-PCR方法从绥农10中克隆该基因,并构建到植物表达载体pCAMBIA3301上,以感病品种东农50的子叶节为外植体通过根癌农杆菌介导的方法进行大豆遗传转化。【结果】该基因全长805 bp,开放读码框为471 bp,编码156个氨基酸,在此命名为SDR1。遗传转化获得转基因PCR鉴定阳性植株5株,Real-time PCR检测T1转基因植株较非转基因植株SDR1表达量提高20倍以上的有3株,经Southern杂交分析表明,出现杂交信号的有3株。经离体叶片接种大豆疫霉菌,转基因大豆的抗性较非转基因大豆明显提高。【结论】成功克隆了大豆疫霉根腐病抗性相关基因SDR1,并通过对过量表达的大豆转基因植株的抗病性鉴定初步确定了SDR1的抗病功能。

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