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玉米叶绿体表达载体构建及绿色荧光蛋白基因瞬时表达检测

文献类型： 中文期刊

作者： 赵彤 1 ; 黄丛林 1 ; 张秀海 1 ; 于荣 2 ; 王永勤 1 ; 吴忠义 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心

2.首都师范大学生命科学学院

关键词： 玉米;叶绿体表达载体;瞬时表达;GFP荧光

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2008 年 04 期

页码： 76-80

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： Tps1是生物保护物质海藻糖的关键合酶基因。构建含Tps1的玉米叶绿体表达载体,首先从玉米叶绿体基因组中克隆16S/trnI-trnA/23S片段,作为定点整合同源片段;然后将编码酵母海藻糖合酶基因Tps1表达盒(Prrn-Tps1-TpsbA-ter)、草丁膦抗性基因Bar表达盒(RpsbApro-Bar-RpsbAter)、卡那霉素抗性基因Npt II和绿色荧光蛋白基因Gfp构建的融和基因表达盒(Prrn-Npt II/Gfp-RrbcLter)一起克隆到定点整合同源片段之间,构建了玉米叶绿体的稳定表达载体mTKGB。通过基因枪轰击法将mTKGB转化到玉米幼嫩叶片中,培养2 d后,在激光扫描共聚焦显微镜下观测到玉米一些细胞的叶绿体中有很强的GFP绿色荧光,结果表明构建的载体可在玉米叶绿体中表达。

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