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大肠杆菌LTb蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 刘焕 1 ; 王一成 1 ; 袁秀芳 1 ; 徐丽华 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 大肠杆菌LTb;单克隆抗体

期刊名称： 浙江农业科学

ISSN： 0528-9017

年卷期： 2008 年 1 卷 05 期

页码： 617-620

摘要： 将大肠杆菌不耐热肠毒素LTb基因去除信号肽后与载体pPIC9K连接,电转化入酵母菌SMD1168中进行诱导表达。用纯化的LTb表达蛋白免疫8周龄BALB/c鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合后,以间接ELISA和有限稀释法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗大肠杆菌LTb单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该株单克隆抗体命名为1F2,2C2,3D6,4H6株。经Western blotting分析,这4株均能与大肠杆菌LTb表达蛋白产生特异性反应。抗体亚型鉴定表明,1F2,2C2,3D6,4H6株均为IgG2a型。成功获得单克隆抗体为今后LTb蛋白的深入研究以及抗原表位分析提供有益价值。

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