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创伤弧菌外膜蛋白OmpU的基因克隆与表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李素一 1 ; 吴唯维 1 ; 李盼 1 ; 柯翎 1 ; 许斌福 1 ; 林晨韬 1 ; 林天龙 1 ; 陈叙 1 ;

作者机构： 1.福建省农业科学院生物技术研究所

关键词： 创伤弧菌;外膜蛋白OmpU;克隆;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体

期刊名称： 福建农业学报

ISSN： 1008-0384

年卷期： 2013 年 28 卷 06 期

页码： 517-521

摘要： 创伤弧菌是导致鳗鲡产生体表溃疡死亡的重要致病菌。本研究克隆了创伤弧菌FJ03-X2株外膜蛋白基因(ompU),构建含该基因的原核表达载体,命名为pET-32a-ompU,将其转化到大肠杆菌E.coli中进行融合表达。37℃,0.5mmol.L-1的IPTG诱导4h,融合蛋白rompU以可溶形式表达,采用Ni-NTA亲和层析法纯化融合蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的rompU为与预期大小一致的单一条带。将纯化的rompU免疫SD级大鼠,ELISA检测收获的多克隆抗体血清效价,并通过Western-blot证实该OmpU多克隆抗体可以识别创伤弧菌FJ03-X2株中的天然外膜蛋白OmpU。

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