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应用RNA干扰技术抑制捻转血矛线虫H11基因研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张平 1 ; 何延华 2 ; 王新华 2 ; 薄新文 2 ; 陈南颍 1 ; 韩猛立 2 ;

作者机构： 1.石河子大学科技学院

2.新疆农垦科学院

关键词： 捻转血矛线虫;H11基因;RNAi;浸泡

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2013 年 50 卷 004 期

页码： 744-752

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]为了检测RNAi沉默H11基因能否模拟H11疫苗免疫效果.[方法]针对H11基因序列设计并合成特异性dsRNA,通过浸泡方式分别将dsRNA导入捻转血矛线虫感染性L3期幼虫体内,利用实时荧光定量PCR分析H11基因在L3期幼虫中的转录抑制效果,同时,将H11-dsRNA浸泡L3期幼虫24 h后感染绵羊,定期采集绵羊粪便检查虫卵数,第30 d后剖检绵羊皱胃,检查荷虫数的变化.研究H11基因的沉默对捻转血矛线虫减虫率和减卵率的疫苗免疫效果.[结果]实时荧光定量PCR检测表明:试验组中H11基因的相对含量显著低于对照组(P<0.01),在浸泡72 h后,H11-dsRNA组基因的表达量仅为对照组的21.33%.绵羊体内干扰沉默效果显示,试验组H11干扰组虫卵减少率为41.02%,减虫率为39.6%.[结论]研究通过浸泡法导入的dsRNA能有效抑制H11基因的转录,同时H11基因的沉默与幼虫的发育密切相关,为捻转血矛线虫及其它寄生线虫的基因功能研究提供一种新的方法.

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