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4Aβ_(15)基因在毕赤氏酵母中的分泌表达及初步纯化

文献类型: 中文期刊

作者: 谭琳 1 ; 谭昕 2 ; 周鹏 3 ; 姚志彬 1 ;

作者机构: 1.中山大学

2.海南大学

3.中国热带农业科学院

关键词: 4Aβ15基因;毕赤氏酵母表达;质谱分析;饱和硫酸铵沉淀

期刊名称: 生命科学研究

ISSN: 1007-7847

年卷期: 2010 年 14 卷 04 期

页码: 38-43

收录情况: CSCD

摘要: 以pQE4Aβ15为模板,PCR扩增4Aβ15基因,并克隆到pMD18T载体中.以之进一步构建了酵母表达载体pPICZα4Aβ15.通过电转化,重组质粒pPICZα4Aβ15被整合到毕赤氏酵母GS115基因组中.甲醇诱导GS115/pPICZα4Aβ15表达,得到重组蛋白.SDS-PAGE显示重组蛋白的分子质量为18 kD,而4Aβ15的分子质量理论值为8 kD,经Western blot和质谱分析证实重组蛋白为4Aβ15.毕赤氏酵母GS115/pPICZα4Aβ15工程菌发酵上清经60%饱和硫酸铵沉淀初步纯化,获得纯度为80%的重组4Aβ15.

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