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亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆外泌体微小RNA差异表达谱分析

文献类型: 中文期刊

作者: 陈倩 1 ; 冯增强 1 ; 谭琳 2 ; 饶彩霞 1 ; 张炯炯 1 ; 赵静 1 ; 唐秋萍 1 ;

作者机构: 1.海南省血液中心

2.中国热带农业科学院

关键词: 亚甲蓝光化学法;新鲜冰冻血浆;病原体灭活;外泌体;微小RNA

期刊名称: 中国生物制品学杂志

ISSN: 1004-5503

年卷期: 2024 年 007 期

页码: 817-823

收录情况: CSCD

摘要: 目的 探讨亚甲蓝光化学法(methylene blue photochemistry,MB-P)病毒灭活对血浆外泌体微小RNA(microRNA,miRNA)表达的影响,以期为MB-P病毒灭活血浆的质量控制提供新的参考指标。方法 收集2021年7月—2022年4月采集的健康无偿献血者全血11人份。离心获得血浆,同一人份新鲜血浆分为2份,分别制备为新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma,FFP)和MB-P病毒灭活血浆。采用差速离心法提取血浆中的外泌体,通过透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)和纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)仪对提取的外泌体进行鉴定,并利用芯片技术检测外泌体miRNA的表达谱。采用qRT-PCR法对差异表达的4个miRNA进行验证,生物信息学方法预测差异表达miRNA的靶基因,并对差异表达基因进行GO功能富集分析和KEGG信号通路分析。结果 提取的两组囊泡状物质的形态特征及直径大小均符合外泌体特征。与对照组比较,MB-P组血浆外泌体中存在14个差异表达的miRNA,其中6个miRNA表达上调,8个miRNA表达下调。qRT-PCR验证结果与芯片表达趋势一致。差异表达的miRNA靶基因涉及DNA结合、离子结合、催化活性等功能,并参与核酸代谢、生物合成、转录调控等多种生物学过程;富集显著的功能通路与病毒感染性疾病、肿瘤、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路等密切相关。结论 MB-P病毒灭活血浆和FFP外泌体miRNA存在差异性表达,血浆外泌体miRNA有望成为MB-P病毒灭活血浆质量评价的潜在参考指标。

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