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芒果R1MYB1转录因子的克隆及酵母双杂诱饵载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 蔡汝琼 1 ; 吕浩然 2 ; 王旭刚 2 ; 谭琳 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所

2.云南农业大学热带作物学院

关键词： 芒果;R1MYB1转录因子;基因克隆;载体构建

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2024 年 22 卷 024 期

页码： 8137-8143

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： MYB(Myeloblastosis)转录因子广泛参与植物次生代谢产物调控、细胞形态建成、逆境响应及生长发育等过程，同时也是植物原花青素生物合成过程中重要的调控因子。前期研究中，从芒果LAR基因酵母文库筛选中分离获得一个R1型MYB转录因子，命名为MiR1MYB1。为了研究芒果果实中原花青素合成机理，本研究通过PCR克隆获得MiR1MYB1 cDNA全长序列，其全长为1 436 bp，开放阅读框为849 bp，编码282个氨基酸，蛋白分子量为31.25 kD，等电点为9.33。系统发育分析显示MiR1MYB1蛋白与黄林木具有较近的亲缘关系。将其序列定向克隆到酵母表达载体pNC-GBKT7并转化酵母Y2H Gold感受态细胞。对诱饵质粒进行自激活和毒性检测，pNC-GBKT7-MiR1MYB1没有自激活活性和毒性。此表达载体的构建也为后续筛选互作蛋白提供基础。

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