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进口大豆中菜豆晕疫病菌巢式PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 杨万风 1 ; 刘艳 2 ; 刘翔 1 ; 邵沛泽 1 ; 谌运清 1 ; 赵文军 3 ;

作者机构： 1.连云港出入境检验检疫局

2.连云港市农业科学院

3.中国检验检疫科学研究院

关键词： 菜豆晕疫病菌;巢式PCR;检测方法

期刊名称： 中国油料作物学报

ISSN： 1007-9084

年卷期： 2015 年 37 卷 01 期

页码： 113-118

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为实现对进口大豆样品中菜豆晕疫病菌的快速检测,本研究根据菜豆晕疫病菌的argK特异性序列设计引物52B/8F和24B/24F,建立了巢式PCR检测方法,并进行特异性和灵敏度验证。试验结果表明,利用此检测方法对多种参试菌株进行检测时,只有菜豆晕疫病菌呈阳性反应,而其他病菌不产生扩增反应;巢式PCR检测方法对菜豆晕疫病菌基因组DNA和菌悬液检测时,其灵敏度分别达到0.916×10-4ng/μL和2.4×103CFU/m L,比常规PCR灵敏度高1 000倍。在对100份进口大豆样品检测时,3份样品扩增到了特异性条带,测序分析结果证明3份大豆样品中携带的病菌确实为菜豆晕疫病菌。本研究所建立的巢式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短并且检测准确率高等特点,可用于口岸菜豆晕疫病菌的检测。

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