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鸭坦布苏病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 万春和 1 ; 朱海侠 1 ; 施少华 1 ; 黄瑜 1 ; 程龙飞 1 ; 傅光华 1 ; 陈红梅 1 ;

作者机构: 1.福建省农业科学院

关键词: 鸭坦布苏病毒;SYBR GreenⅠ;实时荧光定量RT-PCR

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2013 年 33 卷 07 期

页码: 973-978

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DFV)NS5基因序列特征设计引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测模式的实时荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR,RRT-PCR),该方法检测DFV NS5基因2.74×103~2.74×107拷贝/μL反应范围内有很好的线性关系。扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(86.23±0.18)℃,对禽流感病毒、鸭肝炎病毒、鸭源禽1型副黏病毒、鸭减蛋综合征病毒、番鸭呼肠孤病毒核酸均无阳性信号扩增,可重复性好,组内变异系数为0.52%~1.48%,组间变异系数0.71%~2.21%。检测速度快,从样本处理到报告结果仅需4h。

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